淋巴细胞染色体制备方法
1. 向含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加全血0.5ml，盖紧培养瓶，充分混均；
2. 水平培养72 h(37℃)；
3. 加入20ul 秋水溶液，培养2 h；
4. 离心5 min（2000 rpm）；
5. 去除上清液，保留0.5ml的细胞；
6. 重新充分混悬细胞1；
7. 加入5ml 低渗溶液(KCl 0.075M)，室温低渗7 min；
8. 重复4、5、6操作，用Ibraimov’s溶液混悬细胞；
9. 加入5 ml 调整过的Ibraimov’s 溶液1 2 (92ml H2O+5 ml 冰乙酸+3ml 甲醇)，混均，室温处理5 min；
10. 重复4、5、6操作，用甲醇溶液混悬细胞1，室温保持不超过5 min；
11. 重复4、5操作，用固定液混均细胞；
12. 加入5 ml固定液1，重新混均3；
13. 离心(1200 rpm) 5 min，去除全部上清液；
14. 加入0.5ml新鲜配置的固定液混悬细胞3；
推荐：a. 滴片前将此样在室温下保持30min；.
b. 使用新鲜配置的固定液；
15. 滴片(干净的玻片)，在Maxchrome仪器中分散染色体4。
1 使用混旋器，保证悬浮细胞的一致性。
2 产生均匀的褐色和泡沫表明此步操作非常成功。
3 如果样品暂时不滴片，请在冰箱中保存。
4 Maxchrome的使用注意事项：
a) 如果看到中期细胞没有染色体（“broken metaphases”），表明RH值过高；
b) 如果染色体没有完全分散，细胞质背景较重，表明RH值偏低。
推荐
