分析测试百科网 > 行业资讯 > 技术原理

染色体G显带技术

2019.4.18

实验概要

本文介绍了染色体G显带技术的原理、实验步骤及注意事项等。

实验原理

人们用物理、化学因素处理后，再用染料对染色体进行分化染色，使每条染色体上出现明暗相间，或深浅不同带纹的技术称为显带技术（banding technique）。染色带的数目、部位、宽窄和着色深浅均具有相对稳定性，所以每一条染色体都有固定的分带模式，即称带型。染色体带型是鉴别染色体的重要依据。染色体分带技术可分为两大类，一类是产生的染色带分布在整条染色体的长度上如：G、Q和R带；另一类是局部性的显带，它只能使少数特定的区域显带，如C、T和N带。

染色体带型的形成主要取决于DNA、核酸结合蛋白及染料三者的相互作用，主要是指DNA的碱基组成以其与结合蛋白形成的特定结构对染料分子的作用。Summer(1974)的实验表明，DNA分子的螺旋及折叠非组蛋白蛋白质的分布在染色体上呈区域性差异，这些差异导致二硫键与硫氢键分布不同，深染区由许多二硫键交联，因为它易与染料结合；而浅染区则缺乏二硫键、多硫氢键，不易与染料结合而呈浅色。此外，由于染色体内DNA的碱基分布不同而造成DNA螺旋，折叠的程度也不同，继而影响到结合蛋白的分布与构型，与染料结合后呈现深浅不同的带纹。

G带即吉姆萨带，是将处于分裂中期的细胞经胰酶或碱、热、尿素等处理后，再经吉姆萨染料染色后所呈现的区带，是目前被广泛应用的一种带型。其特性是显带方法简单恒定，带型稳定，保存时间长。一般认为，易着色的阳性带为含有AT多的染色体节段，在间期核呈固缩状态，而且是DNA晚复制区之一，有相当一部分中度重复序列DNA可能在G带区；相反，含GC多的染色体段则不易着色。也有人认为，Giemsa染料在G带区是与DNA结合，而且与结合DNA的染色质非组蛋白有关。总的来说，G显带的机制还未搞清。

主要试剂

1. pH6.8 PBS

2. Giemsa

3. 0.025%胰蛋白酶（取0.9%氯化钠100ml，加0.25%胰蛋白酶1ml）

主要设备

1. 离心管

2. 离心机

3. 天平

4. 37℃温箱

5. 载玻片

6. 盖玻片

7. 恒温水浴锅