ABI 3730XL测序平台的原理及特点
Applied Biosystems 3730XL测序仪是高质量的长片段读取和序列分析的测序平台，应用灵活而广泛。3730XL可同时分析96个样品，该仪器采用4色荧光同时检测，可不间断24小时运行，自动灌胶，上样，电泳分离，检测及数据分析。本仪器除了能够完成新基因测序工作或比较测序工作外，还可进行多种片段分析，包括微卫星 DNA 分析，比较基因型分析，单核苷酸多态性 (SNP) 研究等。
ABI 3730XL测序仪
测序峰图
双脱氧链终止法原理
双脱氧链终止法又称为Sanger法，其原理是DNA模板在DNA聚合酶、引物、四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)存在下进行复制时，在四管反应体系中分别按一定的比例引入四种双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3’-OH基团，当ddNTP掺入链的末端时，该链就会停止延伸。如此每管反应体系中就产生了一系列长度不等的以ddNTP为3’端的DNA片段。反应终止后，分4个泳道进行凝胶电泳以分离长短不一的DNA片段，相邻的片段长度相差一个碱基。经放射自显影后，根据片段3’端的双脱氧核苷，便可获得合成片段的碱基排列顺序。
Sanger法测序原理图
ABI 3730XL测序仪技术原理
ABI 3730XL自动测序仪是基于毛细管电泳和荧光标记技术的DNA测序仪。基于Sanger法，3730XL测序仪拥有96道毛细管，并用荧光标记代替了同位素标记，从而大大提高了DNA测序的速度和准确性。4种双脱氧核苷酸(ddNTP)的碱基分别用不同的荧光进行标记，在通过毛细管时不同长度的DNA片段上的4种荧光基团被激光激发，发出不同颜色的荧光，被CCD检测系统识别，并直接翻译成DNA序列。
仪器特点
1. 双光束双侧激光激发，光栅分光装置和后置超薄CCD检测成像系统。
2. 自动灌胶、上样、电泳分离、检测及数据分析，可连续运行24小时无需人工干预。
3. 一次电泳测定96个样品，一天可跑12次测序电泳，每天的测序产率是1152个样品。
4. 自动碱基识别、基因型分析与质量评分判定。
5. 最新POP-7液体分离胶，动态内镀毛细管壁，使读序长度达1000bp以上，精确读序达800bp。
6. 良好的温控装置提供了更大的温控范围(18~70℃)，电泳温度可达70℃，有助于去除二级结构的影响。
7. 高灵敏度减少DNA和测序试剂的使用量。
8. 更高的自动化减少劳力成本及人为失误的成本。
技术应用
1. 菌液、质粒、PCR产物测序
2. Fosmid/Cosmid/BAC双末端测序
3. 大片段鸟枪法测序
4. EST测序和分析
5. 步移测序
6. SNP发现和重测序
7. STR分型
