荧光原位杂交（FISH）之二：实验用具、材料及相关溶液...
实验用具及材料
相关溶液的配制
1）20×SSC：175.3g NaCl，88.2g柠檬酸钠，加水至1000mL（用10mol/L NaOH调pH 至7.0）。
2）去离子甲酰胺（DF）：将10g混合床离子交换树脂加入100mL甲酰胺中。电磁搅拌30min，用Whatman l号滤纸滤。
3）体积分数70％甲酰胺/2×SSC：35mL甲酰胺，5mL 20×SSC，10mL水。
4）体积分数50％甲酰胺/2×SSC：100mL甲酰胺，20mL 20×SSC，80mL水。
5）体积分数50％硫酸葡聚糖（DS）：65oC水浴中融化，4oC或-20oC保存。
6）杂交液：8µL体积分数25％DS，20µL 20×SSC混合。（或40µL体积分数50％DS，20µL 20×SSC，40µL ddH2O混合）取上述混合液50µL，与5µL DF混合即成。其终浓度为体积分数10％DS，2×SSC，体积分数50％DF。
7）PI/antifade溶液
PI原液：先以双蒸水配置溶液，浓度为100µg/mL，取出1mL，加39mL双蒸水，使终浓度为2.5µg/mL。Antifade原液：以PBS缓冲液配制该溶液，使其浓度为10mg/mL,用0.5mmol/L的NaHCO3调pH值为8.0。取上述溶液1mL，加9mL甘油，混匀。
PI/antifade溶液：PI与antifade原液按体积比1:9比例充分混匀，－20oC保存备用。
8）DAPI/antifade溶液：用去离子水配制1mL/mg DAPI储存液，按体积比1:300，以antifade溶液稀释成工作液。
9）封闭液I：体积分数5％BSA 3mL，20×SSC 1mL,ddH2O 1mL,Tween20 5µL混合。
10）封闭液II：体积分数5％ BSA 3mL,20×SSC 1mL,goat serum 250µL,ddH2O 750µL,Tween20 5µL混合。
11）荧光检测试剂稀释液：体积分数5％ BSA 1mL，20×SSC 1mL,ddH2O 3mL,Tween20 5µL混合。
12）洗脱液：100mL 20×SSC，加水至500mL，加Tween20 500µL。
