细胞计数及活力测定方法-2
（三）MTT法测细胞相对数和相对活力
活细胞中的琥珀酸脱氢酶可使 MTT分解产生兰色结晶状甲赞颗粒积于细胞内和细胞周围。其量与细胞数呈正比，也与细胞活力呈正比。
l、细胞悬液以 1000rpm离心 10分钟，弃上清液。
2、沉淀加入 0.5－1ml MTT，吹打成悬液。
3、37℃下保温 2小时。
4、加入 4—5 ml酸化异丙醇（定容）。打匀。
5、1000 rpm离心，取上清液酶标仪或分光光度计 570nm比色，酸化异丙醇调零点。
注意：MTT法只能测定细胞相对数和相对活力，不能测定细胞绝对数。
附：
1、0.4%台盼兰染液配制：
台盼兰 0.4克 加双蒸水至 100 ml。Cbeqe
2、MTT配制：
MTT 0.5克，溶于 100 ml的磷酸缓冲液或无酚红的基础液中。4℃下保存。
3、酸化异丙醇配制：
异丙醇中加入 HCl使最终达 0.04mol/L。
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