电泳分离的蛋白质肽谱和序列分析实验
方案1 蛋白质的过甲酸氧化实验
方案2 蛋白质还原和S-羧甲基化：大规模方法
方案3 蛋白质还原和S-羧甲基化：微量方法
方案4 用Ellman 试剂测定自由巯基和二硫键实验
方案5 蛋白质的胰酶消化实验
方案6 用溴化氰切割 Met-X 键实验
方案7 用羟胺切割 Asn-Gly 键实验
方案8 邻亚碘酰苯甲酸在色氨酸处切割实验
方案9 胶内蛋白质的考马斯亮蓝染色实验
方案10 胶内蛋白质的锌/咪唑负染色实验
方案11 胶内蛋白质的硝酸银染色实验
方案12 胶内蛋白质的S-吡啶乙基化实验
方案13 胶内蛋白质的酶解和肽段提取实验
方案14 电印迹膜上的蛋白质消化实验
方案15标准条件下肽段的反相 HPLC实验
方案16 SDS-PAGE 肽谱作图方法（Cleveland法)
方案17 原位 SDS-PAGE 肽谱作图方法（Cleveland法）
| 实验材料 | 冻干的纯化蛋白样品 |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | 甲酸 氢溴酸 过氧化氢 NaOH 固体 |
| 仪器、耗材 | 旋转蒸发器 小试管 |
| 实验步骤 |
1.加入 100ul 过氧化氢到 900ul 甲酸中，在室温下放置让，将反应产生过甲酸 (HCOOOH)。
2.在冰上冷冻过甲酸至 0°C。
3.在预冷的小试管中，将蛋白质溶解于 50ul 过甲酸中（500ug/ml)。
4.盖上帽子，0°C 孵育混合物 4 h。如果蛋白质不溶，把反应延长到 20 h。
5.加入 30ul 氢溴酸，去除多余的过甲酸。
要特别小心，可能会释放出来少量的溴。
6.用旋转蒸发器或离心冷冻干燥机彻底干燥样品。在浓缩器中加入少量的 NaOH 固体，以去掉多余的溴和甲酸。蒸发干燥约需要 10 min。
由于许多氨基酸被修饰，推荐用过甲酸氧化的蛋白质用于 S—S/S—H(半胱磺酸）和甲硫氨酸基团（甲硫氨酸砜）的定量分析，而不是序列分析。
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