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样本的处理

2020.8.31

   ELISA检测的目的是为实验提供准确可靠的定量分析实验依据。为了保证实验数据的可靠性,在实验过程中必须坚持全面质量控制和全过程质量控制。在收集标本前都必须有一个完整的计划。上海劲马设备有限公司来告诉你。

 

    注意事项:

 

    1.每个标本量收集体积=100ul×检测种类,如要做复孔,标本量收集体积=100ul×检测种类×2 。

 

    2.对于作某一个具体指标来说,先用一系列稀释度作一批标本测定,得出对实验有意义的一个稀释度(即测定剂量反应曲线),然后用一个*适稀释度测定即可。

 

    3.收集标本前必须清楚要检测的成分是否够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储藏在4 ℃ 备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20 ℃ 或  -70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。标本标本2 -8 ℃ 可保存48 小时,-20 ℃ 可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

 

    4.血清标本采集时,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以 HRP为标记的 ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。

 

    5.为了保证尿液检测结果的准确性,必须正确收集尿液标本和保存。盛尿容器要清洁干燥。使用一次性的容器(如塑料尿杯),避免因用药并清洗不干净而造成的污染,影响检测结果。尿液标本必须新鲜,留取后,应及时检测或保存,以免细菌繁殖。因在室温中久置后(尤其是夏季)尿中磷酸盐等可析出结晶而干扰检测。

 

    6.标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性 HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在 ELISA中可使本底加深。

 

    7.冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混合,不要再混合器上强烈振荡。

 

    8.浑浊或有沉淀的标本应先离心或者过滤,澄清后再检测。

 

    9.反复冻融会使蛋白效价降低,所以待测标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。也可以加入适当的防腐剂。

 

   


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