原代细胞实验中样本的处理方法
原代细胞实验中样本的处理方法
1. 血清：全血标本于室温放置2小时或4℃后于1000×g离心20分钟，取上清即可检查，搜集 血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。
2. 血浆：抗凝剂举荐运用EDTA.Na2，标本搜集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可 检查。防止运用溶血，高血脂标本。
3. 安排匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲刷安排，以去掉残留血液（匀浆中裂解的红细胞 会影响测量效果），称重后将安排剪碎。将剪碎的安排与对应体积的PBS（一般按1:9的分量体积比，比方1g的安排样本对应9mL的PBS，详细体积可依据试验需求恰当调整，并做好记载。举荐在PBS中参加蛋白酶抑制剂）参加玻璃匀浆器中，于冰上充沛研磨。为了进一步裂解安排细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或重复冻融。zui终将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟，取上清检查。
4. 细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除掉杂质及细胞碎片。取上清检查。
5. 其它生物标本：1000×g离心20分钟，取上清即可检查
6. 标本应清澈通明，悬浮物应离心去掉。
7. 标本搜集后若不及时检查，请按一次运用量分装，冻存于-20℃/-80℃冰箱内，防止重复冻融， 1-6月内检查,4℃保留的应在1周内进行检查。
8. 如果您的样本中检查物浓度高于标准品zui高值，请依据实际情况，做恰当倍数稀释(主张先做 预试验，以判定稀释倍数)。
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