冷冻蚀刻表面标记免疫电镜技术
冷冻蚀刻表面标记免疫电镜技术
(1)新鲜或固定的细胞进行直接法或间接法免疫标记。
(2)PBS(pH7.5)冲洗3min×2，加入1mmol/l MgCl2蒸馏水洗洗3min×3，离心沉集细胞。
(3)将细胞团置于小纸板上，入液氮冷却的Freon中，取出入冷冻蚀刻仪中进行断裂操作，再于-100℃蚀刻1min 。
(4)制做断裂面复型。
(5)再次氯酸钠清洗复型，蒸馏水洗后进行观察。
本法可显示断裂暴露的PF位于中央，周围则是蚀刻后露出来的ES，标记物只出现在ES上。
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