线性离子阱多种解离技术对阿德福韦酯杂质谱的全（一）
前言
活性药物成分（API）和成品药的杂质分析是药物研发中不可或缺的一环。杂质的化学结构信息在评估毒性、改进合成途径，以及根据目标成药选择最佳剂型至关重要。
为保证药效与消费者的安全，世界各国的监管机构都制定了药物杂质分析的指引，清楚说明基于日服用量、使用时间，和药物靶标的限量标准。
LCMS 已经成为最常用的未知杂质分析技术。为了能在大量母药中识别并表征痕量杂质，具有高灵敏度、高扫描速度，并且能进行多级质谱分析（MSn） 的质谱仪必不可少。
在本研究中，Sigma-Aldrich 所售的研究级阿德福韦酯（adefovir dipivoxil，ADP） 被用来作为模型化合物进行API 杂质分析。ADP 是广泛用于慢性乙肝病毒感染的一种抗病毒处方药。本研究中使用的LCMS 系统由Thermo Scientific AccelaTM UHPLC 以及 Velos ProTM 线性离子阱质谱仪构成。碎片信息通过结合应用 CID 与Trap-HCD 解离技术获得。数据处理通过软件Mass FrontierTM 完成。
分析方法
材料与试剂
阿德福韦酯（Adefovir dipivoxil，CAS# 142340-99-6）从Sigma-Aldrich 购得，产品号A9730。
乙腈和水 （Fisher）；乙酸铵（Sigma-Aldrich，产品号73594-25G-F）；甲酸（Sigma-Aldrich，产品号33015-500ml）。
样品制备
ADP 溶液，0.5mg/mL，用1 ml 20 : 80 的乙腈和水混合溶剂溶解0.5mg ADP 获得。
HPLC 方法
HPLC 系统：Thermo Accela 1250 泵，开放式Accela 自动进样器及Accela PDA
色谱柱： Hypersil GOLD C18 2.1×150 mm，3 μM，
Thermo Scientific 产品号 071399
柱温：35 ℃
流速：0.5 ml/ 分钟
进样体积：8 μl
流动相：A – 水，B – 乙腈，C - 100 mM 乙酸铵，用乙酸调至pH 5
梯度洗脱：
质谱方法
质谱仪：配有 HESI-II 离子源的Velos ProTM 线性离子阱离子化条件：电喷雾， 正离子模式
1. 全扫模式 m/z 120-1000 amu/ Top5 dd MS/MS，HCD NCE 35%
2. 全扫模式/ 按母离子列表dd MS2/ TOP 3 ddMS3,CID/ Trap-HCD NCE 20%
a. CID MS2 / CID MS3
b. CID MS2 / HCD MS3
c. HCD MS2 / CID MS3
d. HCD MS2 / HCD MS3
