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分离基因组DNA和质粒DNA有哪些不同之处

2021.11.16

分离质粒时,可以将质粒去得很干净。
方法为:先用TE之类的试剂将菌液悬浮起来,再用NaOH和SDS将菌液裂解(起裂解作用的主要是NaOH,但此时,SDS可以与蛋白很好的结合)。第三步,加入酸中合第二步中的碱,并且将SDS沉淀下来,同时,SDS和蛋白也一起沉淀下来,而基因组上面有很多的蛋白,这样基因组就一起沉淀下来,上清只有质粒了。上清的质粒用乙醇沉淀,这样得到的质粒基本没有基因组。
而分离基因组时,一般也是用SDS裂解(想对于碱裂解,SDS比较温和)。同时还用蛋白酶K处理,将基因组上的蛋白降解掉,这样就得到了基因组DNA。再用乙醇沉淀,去掉其他的东东。如果菌中含有质粒,质粒也一起提出来,无法去掉。
至于后来的试剂盒,如柱式,前其原理一样,不过最后一步纯度是用柱子的方法。

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