凝胶层析技术的原理和过程
凝胶层析（又叫凝胶过滤或分子筛）
凝胶层析是指混和物随流动相流经固定相的层析柱时，混合物中各组分按其分子大小不同而被分类的技术。
1. 原理
凝胶层析的固定相是凝胶。凝胶是一种不带电荷的具有三维空间多孔网状结构的物质，凝胶的每个颗粒内部都具有很多细微的小孔，如同筛子一样。
常用凝胶有琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、葡聚糖凝胶等。
葡聚糖凝胶介质是由多聚葡聚糖与环氧绿丙烷交连而成。zui常用的葡聚糖凝胶层析介质是Sephadex G系列，不同型号的凝胶用G表示，G代表交联度，从G10到G100。“G”后面的 数字表示每10g干胶的吸水量，可根据待分离混和物分子量大小选用不同“G”值的凝胶。
2. 分离过程：
样品随洗脱液的流动下移
3. 影响凝胶柱层析的主要因素
（1）层析柱的选择与装填
层析柱的大小应根据分离样品量的多少及对分辨率的要求而定。凝胶柱填装后用肉眼观察应均匀、无纹路、无汽泡。
（2）流动相――洗脱液的选择：是含有一定浓度盐的缓冲液，目的是为了防止凝胶可能有吸附作用。其选择主要取决于待分离样品，一般来说只要能溶解洗脱物质，并不使其变性的缓冲液都可用于凝胶层析。
（3）加样量：加样量的多少应根据具体的实验而定：一般分级分离时加样量约为凝胶柱床体积的1％－5％，而分组分离时加样量约为凝胶柱床体积的10%-25%.
（4）凝胶再生：葡聚糖凝胶再生使用NaOH（0.2M）和NaCl(0.5M)混合液处理。
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