质粒DNA的转化(CaCl2法)
实验原理受体细胞经过一些特殊方法如化学试剂法的处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞。进入受体细胞的DNA分子通过复制，表达实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养，即可筛选出转化子(即带有异源DNA分子的受体细胞)。
CaCl2法的基本原理：细菌处于0℃，CaCl2低渗溶液中，细胞膨胀成球形，外源DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸盐混合物黏附于细胞表面，经短时间42℃热激处理，促进细胞吸收DNA复合物。将细菌放置在非选择性培养基中保温一段时间，促使在转化过程中获得的新的表型，如氨苄青霉素耐药（Ampr）得到表达，然后将此细菌培养物涂在含Amp的选择性培养基上，倒置培养过夜，可获得细菌菌落。
转化(Transformation)是将外源DNA分子引入受体细胞，使之获得新的遗传性状的一种手段，它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究领域的基本实验技术。
一、材料
pUC19质粒，大肠杆菌感受态，1.5ml塑料离心管，离心管架，
1000 ul、200ul枪头，9cm培养皿，一次性滤膜（0.22um），大量碎冰
二、设备
微量移液器(2μl,200μl,1000μl)，高压蒸汽消毒器(灭菌锅)，培养箱，恒温水浴锅，恒温摇床，离心机 超净工作台，双蒸水器，冰箱等。
三、试剂准备
LB固体培养基
LB液体培养基
氨苄青霉素（apm）：无菌水配置成100mg/ml溶液，用滤膜抽滤，-20℃保存
灭菌双蒸水ddH2O
四实验操作
（1） 平板的制备：LB固体培养基中加入Amp (100μg/ml)，转化反应前一天，倒置平板，保存。
（2） 分别用2个100µl感受态细胞悬液(如是冷冻保存液，则需化冻后马上进行下面操作：
第一组，质粒DNA组：2 µl pUC19质粒DNA +100µl感受态细胞悬液
第二组，空白对照组，2ul无菌水＋100µl感受态细胞悬液
（3） 将以上各样品轻轻摇匀，冰上放置20-30min，于42℃水浴中保温90s，然后迅速冰上冷却2min
（4） 立即向上述管中分别加入0.4ml LB液体培养基（在超净工作台操作，不需要在冰上），使总体积到0.5ml，摇匀后于37℃振荡培养约30-60min，使受体菌恢复正常生长状态，并使转化体表达抗生素基因产物(Ampr)。
（5） 将培养液以5000rmp离心2min，在超净工作台取各样品培养液0.1ml在平板上涂布，分别接种于含抗菌素LB平板培养基上（做好标记，日期），涂匀。
（6） 在菌液完全被培养基吸收后，培养皿倒置于37℃培养箱中过夜(12-16小时)，
观察转化子出现的情况，待菌落生长良好而又未互相重叠时停止培养。
