ClonePix结合CloneSelect Imager技术加强开发病毒特异...（一）
ClonePix结合CloneSelect Imager技术加强开发病毒特异性的杂交瘤细胞
ClonePix结合CloneSelect Imager技术加强开发 病毒特异性的杂交瘤细胞 
双链DNA病毒引起人类大多数疾病。疱疹病毒和腺病毒家族和乳头瘤病毒在人体中会产生相似的症状。而且，由于病毒抗原基因组的保守，对于特殊病毒的血清学和蛋白诊断确认是非常复杂的。高度的蛋白同源性和血清交叉反应导致双链DNA病毒物种之间区分是非常困难的。本研究的目的是发现识别最优的分泌高度特异性、无交叉反应的单克隆抗体的细胞系，用于生物治疗的开发。
ClonePix系统用来高通量从母本的杂交瘤细胞中（历史数据表明母本的细胞系产量少于1mg/L的单抗）筛选数以百计的亚克隆。分泌高IgG的活细胞进一步用客观评价细胞生长的CloneSelect
Imager系统来评估。高效自动化克隆选择技术旨在挽回高滴度的杂交瘤细胞系，这些细胞系能生产抗原高特异性的抗体。ClonePix和CloneSelect Imager配套技术为免疫诊断技术发展提供了足够的病毒抗原的特异性抗体。 材料 1.ClonePix System (Molecular Devices, LLC)
2.CloneSelect Imager (Molecular Devices, LLC)
3.CloneMedia Semi-Solid Media for hybridomas/myelomas (Molecular Devices, LLC Cat #K8600/K8610)
4.CloneDetect Reagent, Mouse IgG (H+L) Specific,Fluorescein (Molecular Devices, LLC Cat #K8220)
挽救低产量的杂交瘤细胞 传统杂交瘤开发的方法涉及骨髓瘤细胞和抗原免疫过的宿主脾细胞的化学介导融合过程。融合的杂交瘤细胞经历了众所周知漫长和低效率的有限稀释法的选择过程，接着用ELISA方法筛选分离出有限数目的抗原特异性单克隆杂交瘤细胞。太长的时间战线（超过30周）和大量的处理过程，使有限稀释法产生不能准确量化活性和生产力的低滴度细胞系。
最早的双链DNA 病毒特异性杂交瘤细胞系是1990s用有限稀释方法开发的，但是筛选的杂交瘤细胞单克隆性和稳定性都不是很好。用不同的血清和培养基组分进行多年的重复培养（静态的和旋转的），这些克隆表现出不稳定（图1）。而且，抗体的产率从来没有超过3mg/L。由于在preps中能观察的差别巨大的聚集物，使得纯化的IgG的质量很难保持一致性。 
通过亚克隆高滴度抗体的亲本细胞系，挽回和稳定特异性的杂交瘤细胞系。ClonePix技术平台利用半固体培养基和CloneDetect无标记检测技术重筛了大量以前融合的杂交瘤细胞（图2），显示了明显的技术优势。 ClonePix高通量筛选方法能够从低产的亲本克隆细胞中挽回高产、稳定的细胞。
