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脱落细胞检查技术和临床应用评价

2021.5.10

(1)标本采集与涂片制备

1)脱落细胞学常用的标本采集方法有:①自然分泌液采集法:包括痰液涂片检查、尿液涂片检查、前列腺液涂片检查及乳头溢液涂片检查。②直视采集法:口腔、鼻腔、鼻咽部、眼结膜、皮肤、外阴、阴道、阴道穹窿、宫颈、肛管等部位可直接用刮片刮取、吸管吸取、刷洗。气管和肺支气管、食管、胃及直肠可用纤维内镜在病灶处直接刷取细胞涂片。③摩擦法:可对鼻咽部、食管和胃等处病灶取材涂片。④灌洗法:向空腔器官、盆腔(剖腹探查时)或腹腔灌注一定量生理盐水进行冲洗,使其中的细胞成分脱落于液体中,收集灌洗液离心涂片,进行细胞学检查。⑤针穿抽吸法:当有浆膜腔(如胸腔、腹腔和心包腔)及关节腔积液时,可用细针穿刺抽吸积液进行细胞学检查。某些深部组织器官,如淋巴结、软组织、甲状腺、肝等可用细针穿刺吸取部分细胞作涂片诊断。

2)涂片制备方法有:①涂沫法:用于稍稠的标本,如鼻咽部标本。②推片法:适用稀薄的标本,如血液和胸腹水等。③压拉涂片法:适于较粘稠的标本,如痰液涂片。④吸管推片法:亦适用于胸、腹水标本。⑤喷射法:用于各种吸取的标本。⑥印片法:是活体组织检查的辅助方法。制备涂片时,标本要新鲜,玻片要清洁,涂片要牢固,涂片均匀且薄厚适度,一般制备4~6张涂片。

3)涂片固定方法:通常采用卡诺固定液及乙醇固定液固定,而大规模防癌普查时多采用95%乙醇固定。①干燥固定:是涂片后待其自然干燥,再进行固定。适于瑞氏和姬姆萨染色。较稀薄的标本如尿液、胃冲洗液等标本常用。②带湿固定:当涂片尚未干燥即行固定的方法称带湿固定。该法固定细胞染色鲜艳,结构清楚。适用于巴氏染色或HE染色。痰液、食管拉网及阴道分泌物涂片等常用。③固定时间:因固定液和标本性质不同而异。一般为15~30min。胸、腹水及尿液等涂片因不含粘液,固定时间可酌情缩短;而痰液、食管拉网及阴道分泌物含粘液较多,涂片固定时间应适当延长。

4)脱落细胞学基本检验的常用染色方法有3种。①瑞氏-吉姆萨染色法,适用于血液及骨髓细胞学检查,操作简便染。②HE染色法,适用于痰液涂片,染色透明度很好,胞核与胞质对比鲜明,染色步骤简便,染色效果稳定。③巴氏染色法,适用于上皮细胞染色或在阴道涂片中观察女性激素水平对上皮细胞的影响,染色效果具有多色性,色彩鲜艳多样,涂片透明性好,胞质颗粒分明,胞核结构清晰,但染色程序较复杂。

(2)显微镜检查:

1)显微镜观察方法:①阅片前,应严格核对送检单和涂片,仔细了解临床的基本情况,结合细胞的形态特征,做出正确的诊断。②阅片时,认真严格的按规定的程序进行观察和诊断:显微镜下视野要有一定的重叠;使用推进器从上向下或从左向右,按顺序观察全张涂片中的每一个视野,最后将盖片边缘也仔细的检查;先以低倍镜为主,宏观涂片中各种细胞成分,发现异常细胞时,再结合高倍镜仔细观察,进行准确诊断。对有诊断意义的异常细胞,应当用标记笔做出标记,标记方法应在实验室内统一。

2)诊断报告方式:脱落细胞学诊断方法分为直接法和分级法两种,目前主要采用改良巴氏五级分类法。此外,妇科细胞学分类,还采用宫颈上皮内肿瘤增生分级法及TBS分类法(1989年美国提出的),而非妇科细胞学分类还采用描述性诊断法,特别是针对细针穿刺细胞学标本。

细胞学诊断和建议,除了包括显微镜所见,如有无炎症感染、核异质和恶性细胞以外,还应当包括建议如何进一步检查,并提供参考建议。

3)脱落细胞学诊断的质量管理体系:质量控制包括细胞学检查的每一个环节:①采集合格的标本,标本中应出现有效的细胞成分,如痰涂片中应有灰尘细胞等。②良好的涂片应分布均匀,薄厚适宜,细胞结构应清晰③标本制好后,应立即固定,一般要制备2~4张涂片。④诊断每一分标本都需须按阅片原则认真观察,并加强与病理学及临床的联系。⑤平时要熟练的掌握细胞学理论知识,且不断学习,以期掌握新技术理论,提高自身的诊断水平。⑥对诊断的涂片要经常重复检查,对一些疑难的问题要进行会诊。⑦对阳性或发现异常细胞的病例,要进行定期随访观察。

(3)脱落细胞学检查的临床应用评价

 1)优点:①脱落细胞学检验病人痛苦少,无不良反应,安全简便。②可多次重复取材。③费用低,对设备要求也不高,操作简单。④诊断迅速,准确性和检出率都高。特别适用于高危人群的随访观察及大规模防癌普查。⑤检查范围广泛,细胞学诊断可以扩大到全身所有组织器官及全身肿瘤(包括转移性肿瘤及内脏器官肿瘤),还可以诊断非肿瘤性疾病,如病毒、霉菌等感染。

2)不足:①有一定的误诊率。②细胞学诊断不能确定肿瘤的具体部位;对恶性肿瘤,特别是对一些低分化的肿瘤分型诊断准确性较低。③非肿瘤性疾病的诊断研究的少。  

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