PBMC细胞的精确计数和活性分析（二）
三、如何精确计数PBMC和活力分析检测
通过AOPI染料进行双荧光计数和活力分析，是可以排除红细胞、血小板、细胞碎片等污染的精确计数方法。
AO（吖啶橙）和PI（碘化丙啶）是可对DNA染色的细胞核染色试剂。其中AO可以通过完整的细胞膜，嵌入所有细胞（活细胞和死细胞）的细胞核，呈现绿色荧光；PI只能通过不完整的细胞膜，即死细胞的细胞膜，嵌入所有死细胞的细胞核，呈现红色荧光。
活死单个核细胞可呈现荧光信号。而成熟的红细胞及血小板，因为没有细胞核，不能被AO/PI染色，因此可以完全被排除在外不被计数。
通过AOPI染料进行双荧光计数和活力分析，可以精确计数分离后的PBMC以及活力分析，亦可进行全血中的PBMC。
分离液后样本PBMC计数&活性分析举例 全血样本PBMC计数细胞及活性分析举例
明场图像显示RBC/血小板污染 明场图像根本无法计数
双荧光活力分析仪结果报告输出 双荧光活力分析仪结果报告输出
四、Cellometer细胞计数和活力分析仪器型号选择
1. 双荧光计数和活力分析是PBMC计数的最佳选择方法。
三款仪器型号可选：AUTO2000/K2/ VISION CBA，可精确、快速、简便进行PBMC计数和活力分析。
AUTO2000双荧光细胞活力分析仪 K2双荧光细胞分析仪 VISION CBA细胞功能分析系统
触屏操控 电脑操控 电脑操控，高配置，可分析凋亡&细胞周期等
2. 明场的自动细胞计数仪进行PBMC计数，可通过台盼蓝排斥法进行PBMC的活力检测。
虽然也能达到自动、快速的目的，但是仍无法有效的排除红细胞的干扰，达到精确计数的目的。
台盼蓝排斥法检测细胞死活，是通过台盼蓝这个细胞活性染料，其不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色，但死亡细胞的细胞膜通透性增加，可使染料通过细胞膜进入细胞内，使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。
但是台盼蓝排斥法并不能精确计数活死细胞，原因是细胞膜通透性不一样，进入细胞内的染料差异也很大，所以经常会出现很难判定是死细胞还是活细胞。
如果对PBMC计数的准确性要求不是很高，但是需要快速、自动计数，而且对实验的一致性和重复性的要求高，可选择以下三款计数仪：AUTO1000/MINI/AUTO T4。
MINI自动细胞计数仪 AUTO1000一体式细胞计数仪 AUTO T4自动细胞计数仪
电脑操控，小巧美观，性价比高 一体化设计，触屏操控 经典款，符合GLP/GMP
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