关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

如何处理ficoll分离PBMC细胞时总会带一些红细胞

2023.5.25

标准:Ficoll-泛影钠(Ficoll-Hypaque)密度梯度及红细胞裂解1)取50ml聚乙烯管菌采集外周静脉血加4.4ml3.8%或5%柠檬酸盐液定容至40ml述全血300gX20min离
室温2)吸富含血板清2500gX15min制备血板血浆(platelet-poor
Plasma,
PPP)3)余沉降全血加入5ml 6%Dextran
(量500,000用菌理盐水配制)并用理盐水(0.9%)调节终体积至50ml轻轻、彻底混匀室温沉降30min4)吸富含白细胞层液275gX6min5)沉淀细胞用8mlPPP-理盐水(1:4)重悬并移15ml离管6)悬液细胞面加入3mlFicoll-Hypaque(密度1.077)750gX5min室温7)吸取富含性粒细胞红细胞层用0.155M NH4Cl重悬细胞使红细胞裂解性粒细胞用含0.25%BSA
Hanks平衡液(HBSA钙)洗2终用HBSA(含钙)重悬8)用95%性粒细胞

推荐
关闭