关于小儿免疫缺陷疾病的细胞免疫功能测定
(1)延迟性皮肤超敏反应(DCH)：皮内注射抗原0.1ml，于48～72h观察注射部位反应，若红、肿、硬结直径l0～15mm为阳性，>15mm为强阳性。需同时观察5种抗原均为阴性才示T细胞功能缺陷。常用的皮试抗原为：①结核菌素：1∶100至1∶1000旧结核菌素，或10U结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)，观察72h，阴性者再用50U重复试验。②念珠菌液：1∶10～1∶100，观察48h。③毛癣菌液：1∶30，观察48h。④腮腺炎病毒：原液注射，6～8h观察抗体反应(arthus反应)48h观察DCH反应。⑤破伤风、白喉毒素：1∶100观察48h。无以上条件，亦可选用植物血凝素(PHA)66.6mg、链激酶一链导酶1～5U，观察24h。
(2)周围血T淋巴细胞计数：采用单克隆抗体免疫荧光法或酶标法检测CD+3、CD+4、D+8细胞。CD+4T细胞识别主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类抗原，CD+8T细胞则识别MHC I类抗原。CD+4/CD+8T细胞数量异常可导致免疫缺陷或自身免疫疾病。测定CD16表面标记以计数自然杀伤细胞(NK)。疑及高IgM综合征者，用佛波脂酸(PMA)和ionomycin活化T细胞后，检测CD40配体表达。
(3)体外T淋巴细胞功能试验：观察以下功能：①活化功能：用单克隆抗体免疫荧光测定IL-2Ra(CD25)、转铁蛋白受体(DO71)和MHCⅡ类分子表达。②增殖功能：形态学观察淋巴母细胞转化或3H掺入观察增殖指数。③分化功能：培养上清液中IL-2、IL-4、IL-6及IFN-γ等细胞因子的活性测定。
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