非同位素探针进行原位杂交实验地高辛标记探针信号放大

2019.3.30

试剂、试剂盒	10μg ml 羊抗地筒辛抗体 Fab 片段溶于 4×SSC 1% m VBSA (组分V)地高辛信号放大溶液：3. 5〜7. 0 ug ml荧光素标记的兔抗羊IgG (Sigma) 溶于 4×SSC 1% m V BSA (组分 V)
仪器、耗材	Parafilm 膜玻片
实验步骤	1) 用地高辛标记的探针与切片杂交并洗片。 2) 加50μL 10 /ng/ml的羊抗地高辛抗体Fab片段于玻片上，盖以22 mm2大小的Para- film 膜，置 37℃温育 30 min。 3) 移去Parafilm 膜，分别在 4×SSC、0.1 % Triton×-100/4 ×SSC、4×SSC 中洗片，每次15 min。 4) 吸去残余4×SSC，加50μL地高辛信号放大溶液于玻片上，盖以22 mm2的Para- film膜，放加湿盒中。加湿盒外裹以铝箔，置37℃温育30 min。 5) 重复步骤3洗片。 6) 复染，固定并镜下观察结果展开

试剂、试剂盒

仪器、耗材

实验步骤

1) 用地高辛标记的探针与切片杂交并洗片。

2) 加50μL 10 /ng/ml的羊抗地高辛抗体Fab片段于玻片上，盖以22 mm2大小的Para- film 膜，置 37℃温育 30 min。

3) 移去Parafilm 膜，分别在 4×SSC、0.1 % Triton×-100/4 ×SSC、4×SSC 中洗片，每次15 min。

4) 吸去残余4×SSC，加50μL地高辛信号放大溶液于玻片上，盖以22 mm2的Para- film膜，放加湿盒中。加湿盒外裹以铝箔，置37℃温育30 min。

5) 重复步骤3洗片。

6) 复染，固定并镜下观察结果