QPCR内参太高，什么原因
提取组织RNA反转录后做Q-PCR，选18S做内参基因。以前做一般都10个循环左右，最近这一批组织却22个循环。溶解曲线也是好的，反转录体系也没有问题（用以往的RNA同时反转录做Q-PCR，18S的CT值还是10左右）。提取RNA好像也没有问题。我是分离了脂肪组织中的成熟脂肪细胞部分，确实不好提RNA，但是浓度也有300ng/ul左右，260/280是1.8-2.0。
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提取组织RNA反转录后做Q-PCR，选18S做内参基因。以前做一般都10个循环左右，最近这一批组织却22个循环。溶解曲线也是好的，反转录体系也没有问题（用以往的RNA同时反转录做Q-PCR，18S的CT值还是10左右）。提取RNA好像也没有问题。我是分离了脂肪组织中的成熟脂肪细胞部分，确实不好提RNA，但是浓度也有300ng/ul左右，260/280是1.8-2.0。
