解析多肽分离实验
实验方法原理
实验材料 多肽混合物
试剂、试剂盒 0.05 mol／L 和 0.25 mol／L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol／L 氢氧化钠
仪器、耗材 75 μm 内径的融合硅毛细管柱 CE 仪器
实验步骤
1. 用以下溶液冲洗进行预处理毛细管：
10 倍柱体积的 0.1 mol/L NaOH，在低压（0.5 lb/in2）下
10 倍柱体积的水
4 倍柱体积的 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液，pH 2.30。
存储柱于 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液，pH 2.30，25℃。
2. 将 10 nmol （约 300 g） 溶于 10 ml 的 0.05 mol/L 磷酸钠缓冲液，pH 2.30，制备多肽混合物。以每管 100 μl 冻存未用的混合物。
3. 在 0.5 lb/in2，10 s 内用低压注射上样 10～20 nl 样品。
4. 使用以下条件分离多肽混合物：
电解质：0.05 mol/L 磷酸钠缓冲液，pH 2.3
探测波长：200 nm
温度：25℃
电压：25 kV
5. 用以下溶液清洗柱子：
0.5 min，水
1.0 min，0.1 mol/L NaOH
1.5 min，水
1.0 min，0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液，pH 2.30
室温存储柱子于运行缓冲液或水中。
推荐
