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Dam Dcm 甲基化对酶切的影响

2020.7.27

有时质粒用别的酶都切得动,用Bcl I 、Cla I 等酶就是切不动。原因可能在于多数实验室常用的E.coli菌株都有甲基化的功能,而BclI是一个对甲基化敏感的酶。当其识别序列被甲基化后BclI就出现切不动的情况。而BamH I则对甲基化不敏感,所以甲基化与否都照切不误。当你要用BclI这类切点时,请选用甲基化缺陷的Ecoli 菌株如GM119 或其他菌种。有的内切酶对甲基化敏感与否取决于其识别序列两端的碱基,例如Cla I ,3 ‘端相连的碱基为C 时就会对甲基化敏感。

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