TLC中Rf值不稳定的各因素
1. 温湿度 温湿度不稳定。层析时室温差控制在5℃之间。其他条件相同，温度低比温度高展开慢，分离好。湿度可能主要影响薄层板的吸附能力，导致选择性( 容量因子) 的变化。湿度应根据实际情况确定，可通过反复实验进行相应的调整。一般来说，湿度较低时，分离效果较好。
2. 展开剂 展开剂的极性越大，对待定化合物的洗脱能力也越大。
3. 薄层厚度 板厚度变化对比移值影响明显。厚度达0.2mm时，影响较小；在0.25mm，分离效果最佳。
4. 吸附剂含水量 与吸附剂的种类、使用时的加水量、风干时间、活化温度、活化时间等因素有关。
5. 层析缸中蒸汽 缸中蒸汽未达饱和时，比移值不能重现。为使缸中蒸汽饱和，可以在缸内壁附上一层滤纸，让展开剂全部湿润；把展开剂放入层析缸一段时间后再放薄层板；尽可能在恒定温度下层析。
6. 其他因素 展开剂的pH、展开时间、展开距离、样品浓度、点样量、薄层板所用吸附剂中的粘合剂的种类和用量等。
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