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FPLC技术基本实验原理

2022.1.10

  FPLC(fast protein liquid Chromatography)为一种特殊的GX液相层析(HPLC,high pressureliquid chromatography)装置,快速分离纯化和定量测定蛋白质组分是它的主要用途。他的本原理相同于HPLC,就是在高压条件下(20—200 kg/cm2),通过在液相载体中分离物质的迁移速率的差异来进行分离纯化。

  采用HPLC来对生物大分子分离纯化时,因为液相载体通常是有机溶剂,容易变性失活生物大分子,使得生物大分子的回收率降低。同时,采用非惰性的不锈钢来对HPLC系统的流通线路进行制造,金属离子工作状态下可能会发生解离,从而对某些蛋白质组分吸附。

  FPLC的层析柱为耐高压的有机玻璃管,用耐高压的非金属材料制成其它管道,同时采用惰性液相载体,能够使蛋白组分安全快速地分离。所以FPLC对HPLC的操作简易、重复性强、分离速度快等特点加以保留,并且在生物大分子分离纯化过程中分辨率和实用性更加的高。FPLC有其专用预装柱,分子筛、离子交换、疏水层析等各类层析柱也配备了,广泛应用于生物学、化学和环境科学等领域。

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