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光片照明显微镜在淋巴管畸形研究中的应用(二)

2020.4.21

图三 VIPAR方法可以检测出健康皮肤和病理皮肤标本中淋巴管的特征差异。

PDPN阳性淋巴管的3D重建显示了健康皮肤与及淋巴水肿和淋巴管瘤皮肤的明显差异(图3A-3C)。对淋巴管进行分割后的三维可视化显示,淋巴管密度、体积和形态的差异得到了保留。淋巴水肿中不规则排列的淋巴管片段的特征和淋巴管瘤的增生在分割完成的淋巴管中很容易辨认(图3D-3I)。为了定量评估病理样本的变化,我们使用基于分割生成的二值图像提取的骨架(图3J-3L)计算拓扑特征,包括淋巴管的分支点及其连通性(图3M-3O)。


图四:实验组和対照组的血管在数字三维重建中的的自动分割。

基于ESAM1免疫染色(图5,A-C)进行血管系统的评估:通过计算多个高斯尺度上的特征,对血管进行半自动分割,然后手动全局阈值化,得到二值图像,再进行后处理,去除小的分割错误。分割后的血管结构表示为二元体(图5,D-F)。而在随后的骨架化过程中,每条血管内的中轴线均采用立体减薄法计算得出(图5,G-I)。

结论:

综上,VIPAR被证明适用于分析人类皮肤样品中的两种脉管系统。它可以检测出明显的缺陷,并以无偏差的数据提取和形态参数计算定量评估淋巴水肿和淋巴管瘤的病理状态。

 

 


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