病原微生物染色实验——乙型肝炎表面抗原
| 实验方法原理 | 乙型肝炎表面抗原（HBsAg）是由多肽组成的脂蛋白，由于抗原内含有丰富的二硫键成分，经过氧化剂而转变为磺酸，然后再与染色液产生较强的亲和力进行着色。通过地衣红（Orcein）染色法，能够较好地显示乙型肝炎表面抗原（HBsAg）。 |
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| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 地衣红染色液：地衣红 1 g，70％ 乙醇 95 ml，浓盐酸 5 ml。充分溶解后，调 pH 值为 1.2～1.6 即可。 酸性氧化液：高锰酸钾 0.5 g，盐酸 0.15 ml，蒸馏水 10 ml。 草酸溶液：草酸 2 g，蒸馏水 100 ml。 1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。 2. 酸性氧化液处理 5 min。 3. 自来水洗后用草酸溶液漂白 5 min。 4. 蒸馏水洗 3 次。 5. 浸入 70％ 乙醇中 2 min。 6. 浸入地衣红染色液中 5～10 h（对新配制成的染色液，以及室温 15℃ 以下时还可适当延长时间）。 7. 直接用 95％ 乙醇分化至阳性物质清晰为止。 8. 无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。 展开 |
| 注意事项 | 1. 酸性氧化液不能存放时间较长，防止失去氧化作用。 2. 地衣红染色用于肝穿刺时，必要时可用对照片（阳性）进行染色。 |
| 其他 | 结果：乙型肝炎表面抗原阳性物质呈棕色。 |
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