病原微生物染色实验
实验方法原理
真菌是常见的致病菌,其成分含有较多的黏多糖和蛋白质,通过氧化剂,能够促使菌壁的多糖暴露出醛基,然后再与 Schiff 试剂进行结合,生成新的复红复合物而显示真菌的存在,常用高碘酸-复红染色法。
实验材料 石蜡组织切片
试剂、试剂盒 二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水高碘酸Schiff 试剂
仪器、耗材 滴管
实验步骤
高碘酸氧化剂:高碘酸 0.5 g,蒸馏水 99 ml。
Schiff 试剂染色液(参见糖原染色液)。
1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。
2. 高碘酸氧化剂处理 10 min,流水洗 2 次。
3. 蒸馏水洗 2 次,Schiff 试剂染色液处理 20 min 左右,15℃ 以下时在湿盒内加入 50℃ 温水,可加快染色时间。
4. 浸入自来水洗 2 min,明矾-苏木精进行复染 10 s。
5. 无水乙醇脱水,二甲苯透明和中性树胶封固。
注意事项
1. 高碘酸氧化剂置冰箱内保存,可用较长时间。
2. Schiff 试剂染色后,不宜水洗时间较长,以免背景较深。
其他
结果:真菌呈紫红色,背景无色。
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