【汇总】致病菌常见问题解答
Q、1、关于分离平板如何分离划线？
A
分离平板划线最好采用分区划线的方法，目的是将不同菌分离开，便于后续挑取单菌落鉴定。根据增菌液浓度决定不同区之间是否需要烧环或者更换接种环，保证菌落不会过密集或者过于稀疏。
Q
2、选择性分离平板上有的不长菌，有的有典型菌落，如何判断？
A
标准中为了避免漏检，选用了两种或两种以上的选择性分离平板。由于不同种类的沙门在平板上生长有差异，所以某些沙门氏菌会出现在某一种平板上生长，其他平板不生长或者生长不典型的情况。根据标准，任何一种分离平板上出现可疑菌落都需要进行后续的鉴定，不能直接判定。根据后续生化和血清结果再报告检出或者未检出。
Q
3、培养基灭菌前后如何测定pH？
A
培养基pH值测定是完全溶解，灭菌后，冷却至25℃进行测量。我司不推荐灭菌前测定，因为灭菌过程中，温度和成分间的化学反应，会影响pH值。所以，推荐客户灭菌冷却后测量。如果是含琼脂的培养基可以采用固体电极进行测量。
Q
4、血清学鉴定时H血清鉴定使用的半固体琼脂配置及挑菌问题
A
转接半固体培养后，由于琼脂含量低、平板软，所以建议采用一次性接种环轻轻刮取扩散边缘菌苔进行后续操作。金属接种环质地坚硬容易戳破琼脂。
Q
5、血清学鉴定是否需要做分型？
A
按照标准要求报告结果只需报告检出或未检出沙门氏菌，不需要报告具体血清型，所以只需要做O多价和H多价就可以了。如果需要后续进行分型，需要购买群血清及单因子血清。
Q
6、生化鉴定使用的菌悬液浊度要求？
A
生化鉴定套装为微量鉴定系统，对于菌悬液浓度有要求。使用0.5M浊度进行接种。菌悬液浓度过大或者过小对实验结果的准确度有影响。
Q
7、鼠伤寒沙门氏菌接种三糖铁琼脂斜面变黑的问题？
A
可能是由于接种量过大或者培养时间过长导致的，建议减少接菌量或缩短培养时间。
Q
8、BPW在增菌时必需加热到44℃吗？室温的温度可以增菌吗？
A
培养基预热至44℃主要目的是保证乳粉的充分溶解，室温条件下加入样品可能会导致部分样品聚集成团，不易溶解。
Q
9、TSA平板上的可疑菌落没有产黄色素也有可能是阪崎吗？为什么TSA要25℃培养？
A
10、不同克罗诺杆菌的产黄色素能力不同，并且有文献报道约10%的克罗诺菌属的菌株不具有产黄色素的能力，所以仅根据产黄色素进行判定会有漏检的情况，建议结合生化试验进行判断。在25℃时更易观察黄色素的产生，温度过高黄色素颜色会变淡（出自《伯杰氏细菌手册》）。
Q
11、怎么控制0.5麦氏浊度呢？
A
根据我们生化干制套装中提供的0.5麦氏浊度比浊管作为参比，也可以选用浊度仪。
Q
12、为什么用同一株标准菌株 ATCC29544 做阳性添加后做阪崎干制时西蒙氏柠檬酸有阴性也有阳性？
A
如果操作正确，保证菌株活性及纯度的情况下，ATCC29544 这株模式菌株的西蒙氏柠檬酸盐反应应该呈现阳性。
Q
13、乳粉检验中用哪一种显色培养基好？如何选择？
A
ESM015可以进行准确的筛选，相比较而言ESM016 培养基上生长的菌株特异性更强，结果更易观察。
Q
14、为什么这么多温度呢？不同温度的作用能明确吗？
A
不同过程的温度的作用是不一样的。BPW进行36±1℃，主要是为了使得产品中的微生物进行复苏；选择性增菌44±0.5℃是为了提高选择性；TSA 25℃利于黄色素的产生；生化试验30℃是为了提供适宜的温度更利于目标菌的生长并观察生化反应。
Q
15、ESM015培养基对阴沟肠杆菌的选择性效果？
A
目前我们实验室的阴沟肠杆菌标准菌株在ESM015上为白色菌落，但是1%的阴沟肠杆菌是具有α-葡萄糖苷酶的活性，所以极少的阴沟肠杆菌也会呈现蓝绿色菌落。
Q
16、请问两种检测方法该如何选择呢？
A
根据限量标准进行选择，目前限量标准中要求一段奶粉进行定量检测。
Q
17、在检测过程中阳性对照用ATCC29544 那有阴性对照吗 ?
A
阴性对照试验不用全过程添加，只需在部分生化实验时添加阴性对照菌株。
Q
18、万古霉素的添加可以不过滤吗？
A
我公司成品万古霉素已经过过滤除菌，可直接使用，如果自行配制建议进行过滤除菌。
Q
19、阪崎肠杆菌检出，可以原样复检吗？原样复检咋又检不出了？
A
由于微生物的数量和分布不均匀导致，微生物不能复检。
Q
20、自立袋封上后是否制造了无氧环境？阪崎肠杆菌还能很好的生长吗？
A
21、自立袋的封口不会造成无氧环境，阪崎肠杆菌能够正常生长。
Q
22、如果DFI灭菌后有黑色沉淀能继续使用吗？有什么影响吗？
A
培养基高压前进行煮沸即可避免黑色沉淀的产生。
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焦点事件
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综述
