色谱峰分叉是什么原因
1、色谱柱污染
在开始时没问题，在使用一段时间后出现这个问题，可能是由于污染引起的。这时需要对色谱柱加强冲洗，即使用比方法流动相更强的溶剂冲洗色谱柱。图1中使用纯乙腈冲洗色谱柱消除了3号峰分叉问题。
2、保护柱失效
如果样品基质比较脏，使用一段时间之后，发现的峰分叉或拖尾等问题，很有可能是保护柱失效造成的。一般粗略判断标准，塔板数、压力或分离度的改变超过 10%，就需要更换保护柱了。保护柱是消耗品，建议直接更换，不需要再生。
3、接头连接不正确
如果色谱柱在使用过程中发现每个峰的峰形都出现问题，先考察是否有连接问题。
管线可能太长或太短——这种情况可能导致渗漏或峰分叉/拖尾，如图2所示。如果管线太长，密封圈位置不当，将发生渗漏。如果管线推出的距离不够，将会产生一段死空间，形成混合腔。
导致柱外体积，使峰形变坏。如果您使用的是不同厂商的色谱柱，一定要确保使用正确的接头，并保证色谱柱末端接头位置正确。
安捷伦推荐带前后垫圈的 Swagelok 型接头，能让安捷伦液相色谱系统获得最佳性能。在所有仪器连接处都可以使用这种接头，包括阀、加热器、连接色谱柱等。进行良好连接的步骤如图所示：
4、溶剂效应
在反相 LC 中， 如使用 100% 有机溶剂或 100% 强溶剂（图4中为乙腈），大体积进样时，将使色谱峰过早洗脱出色谱柱，导致峰变形。如需解决这个问题可以对分析物进行蒸发浓缩，从而减少进样体积。或者进样溶剂改为用水稀释，与流动相更为兼容。
即使进样体积较大也不会出现峰变形。较早流出的峰或靠近溶剂前沿的峰更容易出现拖尾。在液相色谱中用溶于流动相的小体积进样最为理想。
待测组分由色谱柱流出的后通过检测器系统时所产生的响应信号和微分曲线称为色谱峰，或简称峰。
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