微生物实验室常见20种培养基配方汇总（一）
一、糖发酵管
成分：
成分：
牛肉膏 5g
蛋白胨 10g蛋白胨 10g
氯化钠 3g
磷酸氢二钠 2g
0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12mL
蒸馏水 1000mL
PH 7.4
制法
1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。
2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶1000 mL，121℃高压灭菌15min。另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内，以无菌操作分装小试管。
注：蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。
试验方法：从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃培养，一般观察2～3d。迟缓反应需观察14~30d。
二、乳糖胆盐发酵管
成分：
蛋白胨 20g
猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g
乳糖 10g
0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL
蒸馏水 1000mL
制法：将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10 mL，并放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。
注：双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。
三、5%乳糖发酵管
成分：
蛋白胨 0.2g
氯化钠 0.5g
乳糖 5g
2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL
蒸馏水 100mL
pH 7.4
制法：除乳糖以外的各成分：溶解于50mL蒸馏水内，校正pH。将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内，分别灭菌121 ℃ 15min，将两液混合，以无菌操作分装于灭菌小试管内。
注：在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。
四、缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)
成分：
磷酸氢二钾 5g
多胨 7g
葡萄糖 5g
蒸馏水 1000mL
制法：溶化后校正pH，分装试管，每管1mL ，121℃高压灭菌15min。
甲基红(MR)试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。鲜红色为阳性，黄色为阴性，甲基红试剂配法：10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中，然后加入20 mL蒸馏水。
V-P试验：用琼脂培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～4d。哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL充分振摇试管，观察结果阳性反应立刻或于数分钟内出现红色，如为阴性，应放在36±1℃下培养4h再进行观察。
五、营养明胶
成分：
蛋白胨 5g
牛肉膏 3g
明胶 120g
蒸馏水 1000mL
pH 6.8~7.0
制法：加热溶解，校正至pH7.4～7.6，分装小管，121℃高压灭菌10min，取出后迅速冷却，使其凝固，复查最终pH应为6.8～7.0。
试验方法：用琼脂培养物穿刺接种，放在22～25℃培养，每天观察结果，记录液化时间。或放在36士1℃培养，每天取出，放冰箱内30min后再观察结果。
六、苯丙氨酸培养基
成分：
酵母浸膏 3g
DI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g)2g
磷酸氢二钠 1g
氯化钠 5g
琼脂 12g
蒸馏水 1000mL
制法：加热溶解后分装试管，121℃高压灭菌15min，使成斜面。
试验方法：自琼脂斜面上挑取大量培养物，移种于苯丙氨酸琼脂，在36士1℃培养4h或18～24h，滴加10%三氯化铁溶液2～3滴，自斜面培养物上流下，苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色。
七、蛋白胨水(靛基质试验用)
成分：
蛋白胨(或胰蛋白胨)20g
氯化钠 5g
蒸馏水 1000mL
pH7.4
制法：按上述成分配制，分装小试管，121℃高压灭菌15min。
靛基质试剂
柯凡克试剂：将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中，然后缓慢加入浓盐酸25ml。
欧-波试剂：将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内，然后缓慢加入浓盐酸20 ml。试验方法：挑取小量培养物接种，在36士1℃培养1～2d，必要时可培养4～5d。加入柯凡克试剂约0.5mL，轻摇试管，阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约0.5 mL，沿管壁流下，覆盖于培养液表面，阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。
注：蛋白胨中应含有丰富的色氨酸。每批蛋白胨买来后，应先用已知菌种鉴定后方可使用。
八、硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)
成分：
牛肉膏 3g
酵母浸膏 3g
蛋白胨 10g
硫酸亚铁 0.2g
硫代硫酸钠 0.3g
氯化钠 5g
琼脂 12g
蒸馏水 1000 mL
制法：加热溶解，校正pH，分装试管，115℃高压灭菌15min，取出直立候其凝固。
试验方法：挑取琼脂培养物，沿管壁穿刺，于36士1℃培养1～2d，观察结果。产硫化氢者使培养基变为黑色。
注：肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生，应采用三糖铁琼脂或本培养基。
九、尿素琼脂
成分：
蛋白胨 1g
氯化钠5g葡萄糖1g
磷酸二氢钾 2g
4%酚红溶液 3 mL
琼脂 20g
蒸馏水 1000 mL
20%尿素溶液 100mL
制法：将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH，加入琼脂，加热溶化并分装烧瓶。121℃高压灭菌15min。冷至50～55℃，加入经除菌过滤的尿素溶液，尿素的最终浓度为2%，最终pH应为7.2±0.1.分装于灭菌试管内，放成斜面备用。
试验方法：挑取琼脂培养物接种，在36士1℃培养24h，观察结果。尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色。
十、氰化钾(KCN)培养基
成分：
蛋白胨10g
氯化钠 5g
磷酸二氢钾 0.225g
磷酸氢二钠 5.64g
蒸馏水 1000 mL
0.5%氰化钾溶液 20 mL
pH 7.6
制法：将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶，121℃高压灭菌15min。放在冰箱内使其充分冷却。每100 mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1：10000)，分装于12mm*100mm灭菌试管，每管约4mL，立刻用灭菌橡皮塞塞紧，放在4℃冰箱内，至少可保存两个月。同时，将不加氰化钾的培养基作为对照培养基，分装试管备用。
