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马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配方

2020.2.05
中文名

马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配方


英文名

POTATO DEXTROSE AGAR


用途

培养基用于酵米面、变质银耳及其它淀粉类发酵食品引起的食物中毒样品中椰毒伯克霍尔德氏菌的计数及分离培养。


标准

GB/T 4789.29-2003


配方(g/L)

成分           含量(g/L)


马铃薯          300 (从中提取浸出粉)


葡萄糖          20


琼脂           15


最终           pH 5.6±0.2


原理

马铃薯提供各类氮源,碳源,维生素;葡萄糖提供能源;琼脂起固形作用。


用法
  1. 取瓶内马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基干粉39克,用1000ml蒸馏水或纯水溶解。搅拌加热煮沸至完全溶解(不能持续高温加热,建议不要重复煮溶),121℃高压灭菌20min,冷至约50℃,倾注灭菌平皿。


2. 增菌:以无菌操作取检样25 g(淀粉类食品)或1g(鲜银耳),加入GVC增菌液225 mL(淀粉类食品)或20ml(鲜银耳),36 ±1 ℃培养48h。


3. 分离: 在增菌液中用接种环取一环,于PDA平板上划线分离,于36 ±1 ℃培养24-72 h。


4. 观察结果,挑取平板上呈灰白或乳白色,中心有凸起,呈草帽状,直径约1-2mm的可疑菌落进行进一步的试验。


质量控制
  1. 外观方面:


脱水干粉培养基:淡黄色粉末。


溶解后颜色:浅黄色


2. 生物学方面


下列质控菌株接种待测试培养基,35~37℃,24~72h结果如下:


质控菌株及编号指标质控评判标准椰毒伯克霍尔德氏菌ATCC33664生长率(定量)接种菌落<100cfu,与PDA(揶毒专用)(已验证)比较PR≥0.8,菌落灰白或乳白色,中心凸起,呈草帽状,菌落周围有黄色素扩散到基质中


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