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孟加拉红(虎红)琼脂培养基配方

2020.2.05
中文名

孟加拉红(虎红)琼脂培养基配方


英文名

Rose Bengal Agar


用途

孟加拉红(虎红)琼脂供霉菌和酵母的计数、分离和培养用


标准
配方(g/L)

    蛋白胨 5g


  葡萄糖 10g


  磷酸二氢钾 1g


  硫酸镁 0.5g


  琼脂 15g


  孟加拉红 0.03g


  氯霉素 0.1g


  最终pH 7.2±0.2


原理

蛋白胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;磷酸二氢钾为缓冲剂;硫酸镁提供必须的微量元素;琼脂是培养基的凝固剂;氯霉素可抑制细菌的生长;孟加拉红作为选择性抑菌剂可抑制细菌的生长,并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长。


用法

      1、称取孟加拉红(虎红)琼脂31.6g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌20min。


  2、无菌操作称取检样25克(或25mL),放入含有225mL灭菌水的玻璃三角瓶中,振摇30min,即为1:10稀释液,依次做1:100、1:1000……稀释。


  3、根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。


  4、将凉至45℃左右的培养基注入平皿中,待琼脂凝固后,倒置于25—28℃温箱中培养。


  5、3d后开始观察结果,共培养观察5d。


  6、计算方法:通常选择菌落数在10—150之间的平皿进行计数(如食品卫生国家标准),也有选用5—50个之间的平皿进行计数(化妆品卫生规范),同稀释度的2个平皿菌落平均数乘以稀释倍数,即为每克(或每mL)检样中所含霉菌和酵母菌数。


质量控制

孟加拉红(虎红)琼脂倾注平皿后呈玫瑰红色,下列菌株接种后20—25℃培养72h


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