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侧向层析检测--替代PCR的新型快速检测法

2020.3.06


用传统的微生物分析法检测沙门氏菌、克罗诺杆菌等,往往需耗时4天。本文介绍的借助于杂化传感技术的新型检测方式,可在几分钟内完成对rRNA(核糖体核糖核酸)的检测,也可应用于易腐及敏感性食品的快速检测。

侧向层析检测已在妊娠测试等诸多诊断中得到应用。该方法与奥地利SY-Lab 公司开发的杂化传感技术相结合,形成了一种全新的检测方式,现已成功地应用于rRNA的检测中。方法应用两种特殊的寡核苷酸传感器,在对目标组织rRNA排序测定时,一旦反应物到达测试条上的检测区内,即会发生特殊的杂化反应,其中一个传感器作为捕获传感器,将目标rRNA固定在反应区内,另一个镀金纳米微粒的传感器,可用于光学检测。

分析鉴定rRNA

应用rRNA进行DNA的鉴定时,可高效、成倍地应用聚合酶链式扩增反应(PCR), 由于rRNA是以细胞成千上万次复制的形式存在的,无需再次放大,因此首次成功实现了对分子生物学诸多优点的利用(高度灵敏地病原体检测及准确地排位)。“在成功开发了检测肠出血性大肠杆菌(EHEC)和区别血清型0104:H4的PCR测试条之后,我们又为生化实验室提供了检测病原体中rRNA的简便方法。Riboflow快速检测系统,可首次以高专属性和灵敏度在15min之内实现对食材中的细菌性病原体(如沙门氏菌或克罗诺杆菌)的检测,替代以往需耗时数小时且高成本的方式。”SY-Lab公司总经理兼实验室主管Manfred Schinkinger博士说。Riboflow技术是全球首例能如此简捷检测的技术,同样适用于高度复杂的分子生物学分析。既可直接用于传统的选择性富集培养,也可与Bactrac阻抗分析系统联用,以验证活性样品。

简化常规分析

经过简单的技术处理、小型离心机操作和预富集之后,即可在实验室内或现场进行实时检测,这对易变质的样品(如鱼肉)及敏感样品(如婴儿食品)具有决定性的意义。检测方式趋于微型化,仅使用少量反应试剂,降低了生产成本。系统数月前就已通过腓特烈斯多夫中心实验室(CLF)微生物及粉状食品(特别是以乳粉为主的婴儿食品)的验证。据CLF实验室微生物学家Mattias Fischer博士介绍,该方法已作为常规检测手段应用于各种生产场所。“我们还将该系统与Bactrac技术联用,排查有疑问的结果,并得到了实验室工作人员的高度认可。该方法检测速度快、重现性佳,易于掌握,且无需繁琐的移液管操作。”Fischer博士补充道。

侧向层析检测

通过将相应抗体与膜结合,侧向层析检测试纸可应用于妊娠检测中。该技术较微滴板操作简便,但其灵敏度和样品流通量也较小。通过与特殊的杂化传感器技术相结合,还可用于验证rRNA。


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