生物标志物研究与早期药物研发基因表达分析功...（一）
生物标志物研究与早期药物研发基因表达分析功能学检测RealTime ready 应用
生物标志物研究与早期药物研发基因表达分析功能学检测RealTime ready应用
Sabine Lohmann*, Andrea Herold*, Tobias Bergauer#, Anton Belousov+, Gisela Betzl *, Manuel Dietrich*, Manuela Poignée-Heger *, David Geho’, Martin Weisser+
*Roche Applied Science, Penzberg, 德国
+Roche Pharma, Penzberg, 德国
#Roche Pharma, Basel, 瑞士
’Roche Pharma, Nutley, 美国
前言
生物标志物与早期临床药物研发抗-TWEAK复合物研发举例
TWEAK（肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导因子）是一种多功能细胞因子，可控制包括细胞增殖、迁移、分化、凋亡、血管生成，以及炎症在内的多种细胞活动。TWEAK通过与Fn14结合发挥作用，Fn14
是一种具有高度诱导性的细胞表面受体，与包括细胞核因子- kB（NF-kB）途径在内的多种细胞内信号途径具有相关性（2）。
Anti-TWEAK (RO5458640) 是一种直接针对TWEAK的重组人化 IgG1κ单克隆抗体。RO5458640 可与 TWEAK 结合，从而阻断 TWEAK 与受体结合。Fn14：抑制TWEAK：Fn14 信号途径与相应下游作用可促进肿瘤生长 (3)。
TWEAK 可与细胞外受体 Fn14 结合，通过 NF-κB 途径， |
根据文献搜索与TWEAK信号转导途径生物学芯片数据，应用“关键词”搜索功能，于RealTime
ready配置门户网完成一个RealTime ready NF-kB定制型多孔检测板的配置。为生成首个假设，使用RealTime ready
NF-kB panel，于9种不同的肿瘤细胞系（经过处理细胞系对未处理细胞系，于不同时间点，共使用 54
份样本）中，进行体外基因表达分析。根据细胞系结果，使用简化 NF-kB
panel（35种参数），确认体内小鼠移植模型中的潜在生物标志物。基于细胞系与移植物测定结果，鉴定出13种潜在性、候选基因。为对假设进行检验，从上述参数中筛选出
6
种参数，进行人FFPE样本分析。上述6种参数与所选参考基因适合于感兴趣的实体肿瘤（BC、CRC、NSCLC、肉瘤、RCC）。已经开发出RealTime
ready qPCR检测，并已经进行FFPET RNA分离功能的优化。
个体化医疗（PHC）根据基因信息，针对个体的遗传独特性，对个体进行卫生保健、疾病预防与治疗服务，满足个体需要。对特定生物状态指示剂的生物标志物分子的识别与鉴定，在个体化医疗中具有重要作用（1）。因此，生物标志物是药物从靶点鉴定至药物应用生命周期的核心元素。前列腺素特异性抗原
（PSA）、c-反应蛋白（CRP），与HER2/neu仅是众多生物标志物分子中的少数几个。
生物标志物研究中，人们对复杂生物背景下mRNA表达研究抱有浓厚兴趣。RealTime
ready RT-qPCR检测与RealTime ready
配置门户网站在线完成相关标志物基因的选择，qPCR功能检测有助于了解基因表达概况。LightCycler®480多孔板上RealTime
ready 定制型检测多孔板上含有用户选择的、预置人、小鼠或大鼠靶序列qPCR检测(https://configurator.realtimeready.roche.com)。我们已经建立起细胞系（体外）、移植小鼠模型（体内），与各种人类研究样本FFPET切片生物标志物研究的基因表达分析工作流。
生物标志物研究RealTime ready qPCR检测。可满足不同检测质量要求。生物标志物在治疗性药物复合物研发周期全程均非常重要（TWEAK复合物研发仅是一个例子。LightCycler® 480 real-time PCR 平台联合使用。
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