微生物实验室常见20种培养基配方汇总(二)
十一、营养琼脂
成分:
蛋白胨10g
牛肉膏3g
氯化钠5g
琼脂15~20g
蒸馏水1000mL
制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2~7.4。加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。
注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%。
十二、营养肉汤
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 3g
氯化钠 5g
蒸馏水 1000mL
pH7.4
制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225 mL ,121℃高压灭菌15min。
十三、缓冲蛋白胨水(BP)
成分:
蛋白胨 10g
氯化钠 5g
磷酸氢二钠 9g
磷酸二氢钾 1.5g
蒸馏水1000mL
pH 7.2
制法:按上述成分配好后以大烧瓶装,121℃高压灭菌15min。临用时无菌分装每瓶225mL。
注:本培养基供沙门氏菌前增菌用。
十四、EC肉汤
成分:
胰蛋白胨 20g
3号胆盐(或混合胆盐)1.5g
乳糖 5g
磷酸氢二钾 4g
磷酸二氢钾 1.5g
氯化钠 5g
蒸馏水 1000mL
制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121℃高压灭菌15min。最终pH为6.9±0.2。
十五、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)
基础培养基
多胨或眎胨 5g
胆盐 1g
碳酸钙 10g
硫代硫酸钠 3g
蒸馏水 1000mL
碘溶液
碘 6g
碘化钾 5g
蒸馏水 20 mL
制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100mL。分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀,121℃高压灭菌15min备用。临用时每100mL基础培养基中加入碘溶液2mL,,0.1%煌绿溶液1mL。
十六、亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)
成分:
蛋白胨 5g
乳糖 4g
亚硒酸氢钠 4g
磷酸氢二钠 5.5g
磷酸二氢钾 4.5g
L-胱氨酸 0.01g
蒸馏水 1000mL
1% L-胱氨酸-氢氧化钠溶液的配法:称取L-胱氨酸0.1g或(DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氢氧化钠1.5mL,使溶解,再加入蒸馏水8.5mL即成。
制法:将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸馏水中,加热煮沸,候冷备用。另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中,加热煮沸,候冷,以无菌操作与上液混合。再加入1% L-胱氨酸-氢氧化钠溶液1mL。
分装于灭菌瓶中.每瓶100mL,pH应为7.0±0.1。
十七、亚硫酸铋琼脂(BS)
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 5g
葡萄糖 5g
硫酸亚铁 0.3g
磷酸氢二钠 4g
煌绿 0.025g
柠檬酸铋铵 2g
亚硫酸钠 6g
琼脂 18~20g
蒸馏水 1000mL
pH 7.5
制法:
1.将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中。
2将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解。
3将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至80℃。
4将以上三液合并,补充蒸馏水至1000mL,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀,冷至50~55℃,倾注平皿。
注:此培养基不需高压灭菌。制备过程不宜过分加热,以免降低其选择性。应在临用前一天制备,贮存于室温暗处,超过48h不宜使用。
十八、三糖铁琼脂(TSI)
成分:
蛋白胨 20g
牛肉膏 5g
乳糖 10g
蔗糖 10g
葡萄糖 1g
氯化钠 5g
硫酸亚铁铵 0.2g
硫代硫酸钠 0.2g
琼脂 12g
酚红 0.025g
蒸馏水 1000 mL
pH 7.4
制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5 mL,摇匀,分装试管。装量宜多些,以便得到较高的底层。121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用。
十九、三糖铁琼脂换用方法
成分:
蛋白胨15g
眎胨5g
牛肉膏 3g
酵母膏 3g
乳糖 10g
蔗糖 10g
葡萄糖 1g
氯化钠 5g
硫酸亚铁 0.2g
硫代硫酸钠 0.3g
琼脂 12g
酚红 0.025g
蒸馏水 1000 mL
pH7.4
制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5 mL,摇匀,分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层。121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用。
二十、嗜盐性试验培养基
成分:
蛋白胨2g
氯化钠 按不同量加
蒸馏水100 mL
pH7.7
制法:配制2%蛋白胨水,校正pH,共配制5瓶,每瓶100mL。每瓶分别加入不同量的氯化钠:(1)不加;(2)3g;(3)7g;(4)9g;(5)11g。待溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min。