血脂分析的方法学与临床应用新进展(3)
四、 试剂的选择原则与血脂测定的技术指标
(一)、不精密度与不准确度
各实验室进行血脂测定并非要求统一测定方法，而是要求对同一批标本的血脂测定值取得基本一致，要求测定值在可允许的“不精密度”(用变异系数CV表示)及不准确度(用偏差表示)范围内。
对于TC、TG、HDL-C和LDL-C四项，建议不精密度应分别不大于3%、5%、4%和4%，不准确度应尽量分别不大于±3%、±5%、±5%和±4%，总误差应分别不大于9%、15%、13%和12%。总误差=偏差%+1.96CV(与参考血清的靶值比较)。
对于apoAI、apoB和Lp(a)三项，建议不精密度应分别不大于3%、3%和4%，不准确度应分别不大于±5%、±5%和±10%。
(二)、灵敏度
酶法测定血清TC显色剂用酚时，TC 5.17mmol/L时的吸光度A500nm 约0.30～0.35，故A500nm=0.005时的TC浓度约0.08mmol/L。
酶法测定TG灵敏度为2mmol/L TG时A500nm≥0.2。
匀相测定法测定HDL-C、LDL-C时，最小检测水平至少为0.01mmol/L。
免疫浊度法测定血清apoAI、apoB检测下限至少为0.5g/L，Lp(a) 至少为5mg/L。
(三)、可检测上限
酶法测定血清TC血清与酶试剂用量之比为1：100时，测定上限为13mmol/L，过高地提高血清用量的比例，会使测定上限降低。
酶法测定TG线性至少应达11.3mmol/L。
匀相测定法测定HDL-C、LDL-C时线性至少分别应达2.59mmol/L和7.77mmol/L 。
免疫浊度法测定血清apoAI、apoB线性至少不低于2.0g/L，Lp(a) 至少应达800mg/L。
(四)、特异性
酶法测定血清TC时，血清中多种非胆固醇甾醇会不同程度地与本试剂显色。正常人血清中非胆固醇甾醇约占TC的1%，故在常规测定中这种影响可以不计。
酶法测定TG时，脂蛋白脂酶(LPL)除能水解TG外，还能水解甘油一酯和甘油二酯(血清中后两者约占TG的3%)，所以甘油一酯和甘油二酯亦被计算在TG中，实际上测定的是总甘油酯。
匀相测定法测定HDL-C、LDL-C，免疫浊度法测定血清 apoAI、apoB和Lp(a)时回收率应为90%～110%，基本不受其它脂蛋白的干扰。
(五)、干扰因素
酶法测定血清TC时，血红蛋白高于2g/L会引起正干扰，胆红素＞0.1g/L时有明显负干扰。血中抗坏血酸与甲基多巴浓度高于治疗水平时也使结果偏低。
酶法测定TG干扰因素与胆固醇测定类似。胆红素＞100μmol/L或抗坏血酸＞170μmol/L时出现负干扰。血红蛋白的干扰是复杂的。它本身的红色会引起正干扰。溶血后，红细胞中的磷酸酶可水解磷酸甘油产生负干扰 。当Hb＜1g/L时反映为负干扰；＞1g/L时反映出正干扰，但Hb≤2g/L时干扰不显著，明显溶血标本不宜作TG测定。
TG＜5.65mmol/L、胆红素＜513μmol/L、Hb＜5g/L 时，对匀相测定法测定HDL-C、LDL-C，免疫浊度法测定血清apoAI、apoB和Lp(a)，测定结果基本无干扰。
