猪传染性胃肠炎病毒抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明
使用目的：
本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中传染性胃肠炎病毒抗体 (TGEV Ab)含量。
猪传染性胃肠炎病毒抗体(TGEV Ab)酶联免疫分析实验原理：
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猪传染性胃肠炎病毒抗体(TGEV Ab)水平。用纯化的猪传染性胃肠炎病毒抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入传染性胃肠炎病毒抗体(TGEV Ab),再与 HRP 标记的传染性胃肠炎抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的传染性胃肠炎病毒抗体 (TGEVAb)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猪传染性胃肠炎病毒抗体(TGEV Ab)浓度。
试剂盒组成：
30倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
6ml×1瓶
12孔×8条
6ml×1瓶
6ml×1瓶
6ml×1/瓶
终止液
6ml×1瓶
0.5ml×1瓶
1.5ml×1瓶
2 酶标试剂
标准品（480 U/L）标准品稀释液
3 酶标包被板
4 样品稀释液
5 显色剂 A液
6 显色剂 B液
10 说明书
11 封板膜
12 密封袋
标本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
猪传染性胃肠炎病毒抗体(TGEV Ab)酶联免疫分析操作步骤：
标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
240 U/L
120 U/L
60 U/L
30 U/L
15 U/L
5号标准品
4号标准品
3号标准品
2号标准品
1号标准品
150μl的原倍标准品加入 150μl标准品稀释液
150μl的 5号标准品加入 150μl标准品稀释液
150μl的 4号标准品加入 150μl标准品稀释液
150μl的 3号标准品加入 150μl标准品稀释液
150μl的 2号标准品加入 150μl标准品稀释液加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl（样品最终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
配液：将 30倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30秒后弃去，如此重复 5次，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
温育：操作同 3。
洗涤：操作同 5。
显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
10.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 15分钟以内进行。
