聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度-2
③ 分析纯过硫酸胺（AP）（AR） 0.14g加重蒸水至100ml，置棕色瓶，4℃储存仅能用一周，最好当天配制。上述3种试剂用于制备分离胶。
④ 浓缩胶缓冲液：称取1mol/L HCl 48ml，Tris5.98g，TEMED 0.46ml，加重蒸水至80ml,调pH6.7，用重蒸水定容至100ml，置棕色瓶内，4℃贮存。
⑤ 浓缩胶贮液：称Acr10g，Bis2.5g 加重蒸水溶解后定容至100ml，过滤后置棕色瓶内，4℃贮存。
⑥ 40%蔗糖溶液（W/V）
⑦核黄素溶液 核黄素4.0mg，加重蒸馏水溶解，定容至100ml，置棕色试剂瓶内，4℃贮存。
（2）Ph8.3 Tris-甘氨酸电极缓冲液
称Tris6.0g，甘氨酸28.8g,加蒸馏水至900ml，调pH8.3后，用重蒸水定容至1000ml，置试剂瓶中，4℃贮存，临用前稀释10倍。
（3）0．1%溴酚蓝指示剂
（4）染色液
染色液种类较多，染色方法也不完全相同。本实验采用0.05%考马斯亮蓝R250染色液中，含20%磺基水杨酸，其优点是染色、固定同时进行，背景易脱色。0.5%考马斯亮蓝R250的20%磺基水杨酸染色液：考马斯亮蓝0.05g，磺基水杨酸20g，加蒸馏水至100ml，过滤后置试剂瓶内保存。
（5）脱色液 7%乙酸溶液
（6）保存液 甘油10ml，冰乙酸7ml，加蒸馏水至100ml。
（7）1%琼脂（糖）溶液琼脂（糖）1g，加已稀释10倍的电极缓冲液，加热溶解，4℃贮存，备用。
3．器材电泳仪 夹心式垂直板电泳槽。
（三）操作方法
1．安装夹心式垂直板电泳槽
夹心式垂直板电泳槽操作简单，不易渗漏。这种电泳槽两侧为有机玻璃制成的电极槽，两个电极槽中间夹有一个凝胶模，该模由一个上框形凝胶框、长与短玻璃板及样品槽模板（梳子）所组成。电泳槽由上储槽（白金电极在上或面对短玻璃板），下储槽（白金电极在下或面对长玻璃板）和回纹状冷凝管组成。两个电极槽与凝胶模间靠储液槽螺丝固定。各部间依下列顺序组装：
（1）将上储槽和固定螺丝销钉，仰放在桌面上。
（2）将上、短玻璃板分别插到上框形硅橡胶的凹形槽中。注意勿用手接触灌胶面的玻璃。
（3）将已插好玻璃板的凝胶模平放在上储槽上，短玻璃板应面对上储槽。
（4）将下储槽的销孔对准已装好螺丝销钉的上储槽 ，双手以对角线的方式旋紧螺丝帽 。
（5）竖直电泳槽，在长玻璃板下端与硅胶模框交界的缝隙内加入已融化的1%琼脂（糖）。其目的是封住空隙，凝固后的琼脂（糖）中应避免有气泡。
2．配胶
① 分离胶 20ml pH8.9 7.0 %PAA溶液中，凝胶缓冲液（pH8.9）2.5ml，分离胶贮液5.0ml，重蒸馏水2.5ml，充分混匀，抽气10min，最后加AP 10 ml。
② 浓缩胶 pH6.7 25% PAA：浓缩胶缓冲液∶浓缩胶贮液∶40%蔗糖溶液∶核黄素溶液按1∶2∶4∶1的比例混合。
