氯霉素残留及检测
氯霉素最初是从委内瑞拉链丝菌的培养液中提取制得，现在用化学合成法大量生产。是一类广谱抗生素。对革兰氏阳性、革兰氏阴性细菌均有抑制作用。其中对伤寒杆菌、流感杆菌和百日咳杆菌物作用比其它抗生素强，对立克次体感染如斑疹伤寒也有效，但是对革兰氏阳性球菌的作用不及青霉素和四环素。
1、理化特性：性质稳定，在干燥状态下可保存药效达2年以上，易溶于有机溶剂，25℃时100ml水中仅溶解25mg。水溶液呈中性，在酸性和中性溶液中较稳定，遇碱类易分解失效。其合成品具有左旋光性，也称左霉素 ( Laevomycetin )。
2、化学结构：氯霉素是一类1-苯基-2氨基-1丙醇的二乙酰胺衍生物。这类独特的抗生素通常由以下三种化合物组成：氯霉素(CAP)，甲砜(氯)霉素(THA)，氟甲砜(氯)霉素(FLR)。上述三种抗生素都具有共同的主链架，其结构如图所示，它们均被称为：“苯醇类”。
化合物名称 | R1 | R2 | R3 |
CAP | NO | OH | COCHCl2 |
THA | CH3SO2 | OH | COCHCl2 |
FLR | CH3SO2 | F | COCHCl2 |
《多个取代基的1-苯基-2氨基-1丙醇主链》
3、抑菌机理：氯霉素属抑菌剂，高浓度时或作用于对本品成高度敏感的细菌时呈杀菌作用，为脂溶性，通过弥散进入细菌细胞内，并可逆的结合在细菌核糖体的50S亚基上，使肽链增长受阻，因此抑制了肽链的形成，从而阻止蛋白质的合成。
二、氯霉素残留现状及影响
2002年的上半年，围绕着动物源性食品中国与欧盟之间引发了一系列贸易纷争。2002年1月28日，欧盟以氯霉素残留为由宣布全面禁止从中国进口动物源性食品。此项“禁令”封杀了中国每年约7亿美元的相关产品出口。中国方面迅速就此作出回应。外经贸部新闻发言人高燕发表谈话时称中方对此事给予严重关注。并指出，欧盟仅凭没有征求中方意见的考察报告，单方面作出决定，是不公正、不合理的。欧盟是我国蜂蜜传统出口市场，年进口蜂蜜15万吨，其中，自我国进口3-4万吨，占其进口蜂蜜总量的27%左右，据我国海关统计，2001年我对欧盟出口蜂蜜4.3万吨，占全球出口总量的41%。2月7日，英国以氯霉素超标为由停止销售中国蜂蜜， 2月中下旬，英国食品标准局在市场上抽样检测中查出我国蜂蜜含欧盟禁用药物——氯霉素残留，发生了上市中国蜂蜜被召回的恶性事件。并影响到了中国蜂蜜对日本、加拿大等国的出口。中国国家质检总局专门就氯霉素音量先后下发了两个紧急通知(国质检食函［2001］510号、国质检食函［2001］578号)，禁止在出口水产品的饲料、养殖(包括环境、器械等的消毒)、加工、保鲜、包装和运输等生产环节使用氯霉素，并要求各地检验检疫机构加强对出口，限期整改，对如期验收不合格的企业将取消其出口注册资格，禁止其产品出口2002年8月21日农业部和国家质检总局发出联合通知，声明将对中国水产品进行专项整治，以尽快削除药物对中国水产品的危害。
三、危害及影响
1、 骨髓造血机能紊乱:
氯霉素对骨髓贩造血机能有抑制作用，可引起血小板减少性紫殿、粒细胞缺乏症、再生障碍性贫血、溶血性等，多数在长期或多次用药的过程中发生。发生率约为1/100000-1/5000。骨髓的毒性分为两类：一是可逆性抑制。主要影响红细胞、血小板和白细胞的形成。二是再生障碍性贫血。前者与剂量有关，药物的血浓度走过5ug/ml即可出现；后者少见，发生较晚而极为严重，与氯霉素的每日用量和总量均无直接关系。
2、 对早产儿和新生儿的毒性: 在早产儿和新生儿肝内有些酶系统发育尚不完全，葡萄糖醛酸结合的能力较差，因此影响氯霉素在肝中的解毒过程；此外，肾脏排泄能力亦较弱，能招致药物蓄积中毒。
3、 胃肠道症状、口部症状：胃肠道反应主要有腹胀、腹泻、食欲减退恶心、呕吐则少见。口部症状如口腔粘膜充血、疼痛、糜烂、口角炎和舌炎等。
4、 其它不良反应: 可引起视神经炎、视力障碍、多发性神经炎、神经性耳聋以及严重失眠。有时发生中毒性精神病，主要表现为幻视、幻听、定向力丧失、精神失常等。
四、部分国家检验检疫要求：
● 1999年9月13日中华人民共和国农业部发布了《动物性食品中兽药最高残留限量》的通知，规定了氯霉素在所有食品动物的可食用组织中不得检出。
● 中国农业部已将氯霉素从2000年版《中国兽药典》中删除列为禁药。
● 2002年1月，美国食品与药品管理局（FDA）公布了禁止在进口动物源性食品中使用氯霉素
● 欧盟的进口食品卫生标准规定“氯霉素含量标准为不得检出。”其“不得检出”的含义是氯霉素含量在1ppb以下，即含量在十亿分之一经以下。
● 德国部分州的特殊检测标准为0.2ppb。
● 我国方法检测限量值：
牛奶 0.25ng/ml 肉类1.5ng/g 尿液1.0ng/ml
血清0.5ng/ml 蜂蜜 (快检)1.5ng/g 蜂蜜 (18柱) 0.1ng/g
五、氯霉素残留的检测方法：
(一)液相色谱法：
以乙酸乙酯提取,取部分乙酸乙酯提取液,用氮气吹去乙酸乙酯后,残渣溶解于高氯酸中。用正已烷抽去脂肪,用配有紫外线检测器的液相色谱仪测定,外标法定量。
(二)气相色谱法：
组织经β-葡萄糖醛酸酶消化，经乙酸乙酯提取，然后将乙酸乙酯浓缩。加4％氯化钠溶液，剩余的乙酸乙酯用氮气吹干。将盐溶液过C18萃取小柱，用20％甲醇洗涤，用甲醇洗脱。将洗脱液蒸发至干并固化，用配有电子捕获检测器的气相色谱仪测定氯霉素。异氯霉素做内标物定量。本方法在牛肌肉组织的检测限为1.0ng/g。
(三)酶联免疫检测法
目前国内检测瘦肉精都是用ELISA法筛选，再用GS-MS或HPLC确证。ELISA测定法是酶标记的抗体或抗抗体来进行的抗原-抗体反应。由于酶的专一性催化作用，可使原来无色的底物通过水解，氧化或还原反应而显示颜色，所以该法的优点是：1、可以通过颜色来快速做定性结果分析；2、特异性强；3、灵敏度高；4、酶标板上一次可作多份样品检测。
ＥＬＩＳＡ法原理是利用免疫学抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用，通过化学方法将植物辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）与氯霉素结合，形成酶偶联氯霉素。将固相载体上已包被的抗体（羊抗兔ｌｇＧ抗体）与特异性的抗克伦特罗抗体结合，然后加入待测氯霉素和酶偶联氯霉素，它们竞争性与氯霉素抗体结合，洗涤后加底物，根据有色物的变化计量待测氯霉素的量。若待测氯霉素多，则被结合的酶偶联氯霉素少，有色物量就少。用目测法或比色法测定样品中的氯霉素含量，比色的最佳波长为４５０nm，参比波长应大于６5０ｎｍ 。
