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病毒中和实验

2020.8.18

实验方法原理

病毒的复制需要宿主细胞供应原料、能量和复制场所,因此病毒必须在活的细胞内复制增殖。病毒进入机体后,吸附于敏感细胞的表面,然后通过穿入,脱壳,侵入细胞,进行病毒复制和装配,并引起机体感染。特异性的抗病毒抗体(中和抗体)与病毒结合之后,使病毒失去吸附、穿入宿主细胞的能力,从而阻止了病毒在宿主细胞内的复制和病毒感染机体的过程。进行中和试验时,首先将病毒与抗体在适当的条件下混合、孵育后,接种给敏感宿主,然后要观察病毒感染敏感宿主的情况,即观察残存的病毒对宿主的感染力。用敏感动物进行中和试验时,主要观察抗体能否保护易感动物免于死亡、瘫痪;用细胞培养法进行中和试验时,主要观察抗体能否抑制病毒的细胞病变效应 (cytopathic effect, CPE) 或病毒空斑形成等;用鸡胚接种法进行中和试验时,主要通过观察绒毛尿囊膜上的痘疮结构来检测病毒或用血凝试验检测鸡胚尿囊液流感病毒的滴度。

实验材料 具有感染力的病毒(已滴定的标准病毒 100 TCID50 0. 1 ml 或 100 LD50 0. 1 ml)


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