噬菌体文库的铺平板和转移实验
基本方案
| 实验材料 | 噬菌体 |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | 琼脂糖 LB NaOH SSC Tris·Cl |
| 仪器、耗材 | 硝酸纤维素膜 培养箱 |
| 实验步骤 |
1. 通过系列等比稀释滴定噬菌体文库的滴度。
2. 重组噬菌体与铺平板的宿主菌混合于培养试管中（表一），于37 ℃温育20 min。
3. 按每个平板的噬菌体数决定筛选文库时将用到的平板数。
7. 用原珠笔在硝酸纤维滤膜上做好标记，标记面朝上。
10. 接着，滤膜转印面朝上，依次放在3张分别饱蘸下面3种液体的Whatman 3 MM 滤纸上，各1~2 min。
10. 将滤膜置于真空烤箱中80℃干烤90~120 min，或者置于42℃的恒温箱中过夜，若暂不做杂交实验，滤膜可用干燥的滤纸夹好，室温保存。
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