测定比旋光度
有些有机化合物，特别是很多的天然有机化合物，在分子结构上呈现为螺旋形。这样的构成能使偏振光的振动平面旋转一定的角度α，其中使偏光振动向左旋转的为左旋性物质，使偏光振动向右旋转的为右旋性物质。
角度α就是相对应得旋光度。旋光度的大小和样品管的长度（即溶液厚度）成正比。在一定的范围内与溶液的浓度大约为正比关系。此外，旋光度还和溶剂、温度、波长等因素有密切的关系。
所以有必要使用一个标准，以便于比较光学活性化合物的旋光度大小，这个标准就是比旋光度，用于考察单位浓度，单位溶液厚度下的旋光度。
比旋光度是旋光物质重要的物理常数之一，经常用它来表示旋光化合物的旋光性。通过测定旋光度，可以检验旋光性物质的纯度并测定它的含量。测定旋光度的基本结构及其测量原理如下图。
光线从光源经过起偏镜，再经过盛有旋光性物质的旋光管时，由于物质具有旋光性，使得产生的偏振光不能通过第二个棱镜，必须旋转检偏镜才能通过。检偏镜转动角度由标尺盘上移动的角度表示，此读数即为该物质在此浓度时的旋光度α。
旋光度α除了与样品本身的性质有关以外，还与样品溶液的浓度、溶剂、光线穿过的旋光管的长度、温度及光线的波长有关。一般情况下，温度对旋光度测量值影响不大，通常不必使样品置于恒温器中。因此常用比旋光度[α]λt来表示各物质的旋光性。在一定的波长和温度下比旋光度[α]λt可以用下列关系式表示：
纯液体的比旋光度= [α]λt=α/（d·l）
溶液的比旋光度= [α]λt=100·α/（c·l）
α：标尺盘转动的角度读数（即旋光度），用旋光仪测定；
λ：光源的光波长；
d：纯液体的密度（单位：g/cm3）；
l： 旋光管的长度（单位：dm）；
c：溶液的浓度（100mL 溶液中所含样品的质量，g）；
t： 测量时的温度（℃）。
操作：
1. 溶液样品的配制：
在分析天平上精确称取0.1至0.5g 纯样品，溶解，置于25mL的容量瓶中定容，溶剂常选水、乙醇、氯仿等。溶液配好后必须透明无固体颗粒，否则须经干滤纸过滤。当用纯液体直接测量其旋光度时，若旋光角度太大，则可用较短的样品管。
2. 样品的装入：
将样品管的一头用玻盖和铜帽封上，然后将管竖起，开口向上，将配制好的溶液或纯液体样品注入到样品管中，并使溶液因表面张力而形成的凸液面中心高出管顶，再将样品管上的玻盖盖好，不能带入气泡，然后盖上铜帽，使之不漏水。
注意：在玻盖与玻管之间是直接接触，而在铜帽与玻盖之间，需放置橡皮垫圈。铜帽与玻盖之间不可拧得太紧，只要不流出液体即可。如果旋得太紧，玻盖产生扭力，使样品管内有空隙，影响旋光。
3. 旋光仪零点的校正
在测定样品之前，先校正旋光仪的零点。将样品管洗干净，装上蒸馏水，使液面凸出管口，盖好盖子。将样品管擦干，放入旋光仪内，罩上盖子；然后开启钠光灯，再调节仪器的目镜的焦点，使视场内三部分的明暗相间，分界线清晰（如图2.30 所示），记下其读数。
4. 旋光度的测定
测定之前样品管必须用待测液洗2～3 次，以免有其它物质影响。依上法将样品装入旋光管测定旋光度，这时所得的读数与零点之间的差值即为该物质的旋光度。记下此时样品管的长度及溶液的温度，然后按公式计算其比旋光度。
5. 实验结束后，洗净旋光管，装满蒸馏水。
注意：
1.一般旋光仪的刻度盘的最小刻度为0.25°，加上游标，可读至0.01°。
2.在测定零点（或旋光化合物的旋光度）时，必须重复操作至少五次，取其平均值。若零点相差较大，应重新校正。
