蛋白表达不出来怎么办
第一步:确定载体序列是否正确，启示子、终止子、读码框等;
第二步:确定操作步骤是否正确，如载体是否被污染，是否成功转化入rossetta，抗生素是否正确等;
第三步:核对目的基因序列，与大肠杆菌常用密码子作对比，优化密码子;
第四步:以上三步没有问题时，若还不表达，更换载体;
第四步:更换载体还不表达，选择GST、MBP、SUMO、GB1等助溶标签融合表达。
另外，当目的蛋白太小或太大时可能都不易表达:小肽易被降解;太长例如大的膜蛋白等表达量往往也很难优化。
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第一步:确定载体序列是否正确，启示子、终止子、读码框等;
第二步:确定操作步骤是否正确，如载体是否被污染，是否成功转化入rossetta，抗生素是否正确等;
第三步:核对目的基因序列，与大肠杆菌常用密码子作对比，优化密码子;
第四步:以上三步没有问题时，若还不表达，更换载体;
第四步:更换载体还不表达，选择GST、MBP、SUMO、GB1等助溶标签融合表达。
另外，当目的蛋白太小或太大时可能都不易表达:小肽易被降解;太长例如大的膜蛋白等表达量往往也很难优化。
