细胞色素C溶液的检查方法
含铁量照紫外可见分光光度法(通则0401)测定标准铁溶液取硫酸铁铵50g,加水300ml与硫酸6ml的混合溶液溶解后,加水适量使成1000ml,摇匀。精密量取25ml,置碘瓶中,加盐酸5ml,混合,加碘化钾试液12ml,密塞静置10分钟,用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定,至近终点时,加淀粉指示液1ml,继续滴定至蓝色消失。每1ml硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于5.585mg的Fe。根据硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)消耗的量(ml),计算每1ml中含Fe量(mg)。精密量取适量,加硫酸稀释液(取稀硫酸2ml,用水稀释至500ml)制成每1ml中含23gg的Fe。供试品溶液精密量取本品适量(约相当于细胞色素C00mg),置10ml量瓶中,用水稀释至刻度测定法精密量取供试品溶液5ml,置已炽灼至恒重的坩埚中,蒸干,在105℃干燥至恒重,精密称定重量W1,缓缓炽灼至完全炭化后,继续在500~600℃炽灼使完全灰化并恒重,精密称定重量W2。另精密量取供试品溶液1ml,置25ml量瓶中,加30%过氧化氢溶液0.7ml与稀硫酸0.5ml,置水浴中,加热30分钟,取出,放冷,精密加人联吡啶试液2ml,置冷水浴中,缓缓加人亚硫酸钠试液5ml,随加随振摇,置60~70℃水浴中,加热30分钟,取出,放冷,用水稀释至刻度,摇匀,在522nm的波长处测定吸光度A1,另精密量取标准铁溶液2ml,置25ml量瓶中,照上述方法,自“加30%过氧化氢溶液0.7ml”起,依法操作,测定吸光度A2,按下式计算,A1×23含铁量%A2(W1=W2)×100%限度应为0.40%~0.46%。细菌内毒素取本品,依法检查(通则1143),每1mg细胞色素C中含内毒素的量应小于5.0EU。过敏反应取本品适量,加注射用水稀释制成每1ml中含细胞色素C7.5mg的溶液,作为供试品溶液,依法检查(通则1147),应符合规定。活力照细胞色素C活力测定法(通则1206)测定,不得低于95.0%。
