染色体CBG标本制备实验
基本方案
| 实验方法原理 |
异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的，因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近，或在染色体臂上呈现“团块”，这些染色质主要由C显带技术呈现，故称为C带。CBG即C带、Ba（OH）2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA，但在C带区有很强抗性，仍保留大部分DNA，Giemsa染色后可见效果良好的C带。 |
|---|---|
| 实验材料 | 染色体标本 |
| 试剂、试剂盒 | HCl Ba（OH）2 SSC Giemsa染色液 |
| 仪器、耗材 | 恒温水浴箱 染色缸 显微镜 |
| 实验步骤 |
一、用品和试剂 0.2N HCl，5% Ba（OH）2，2×SSC，Giemsa染色液。恒温水浴箱，染色缸。其余同外周血染色体制备。 二、操作步骤 1. 酸处理：常规制作的染色体标本（未染色）置0.2 N HCl（室温）处理15-30分钟。水洗。 2. 碱处理：浸入已预温至56℃的5% Ba（OH）2水溶液10分钟。水洗。 3. 热盐处理：置2×SSC溶液（67℃）处理60-90分钟。水洗。 4. 染色：l∶10 Giemsa染色液染色10-5分钟。水洗。气干。 5. 镜检。
1. 酸处理：常规制作的染色体标本（未染色）置0.2 N HCl（室温）处理60分钟。水洗。
2. 碱处理：浸入1% Ba（OH）2水溶液（50℃）中15-20秒。水洗。
3. 热盐处理：置2×SSC溶液（60℃）90分钟。水洗三次。
4. 染色：l∶10 Giemsa染色液染色10分钟。水洗。气干。
5. 镜检。
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