BIOG病毒RNA提取试剂盒使用说明
BIOG病毒RNA提取试剂盒说明书(中量)
运输条件:常温运输
货 号:51027-M:10次反应
51028-M:20次反应
储存条件:室温(15-25℃),消化液、RNA Carrier请于-20℃存放
试剂盒组成
组分 | 10次 | 20次 |
吸附柱和收集管 | 各10个 | 各20个 |
裂解液 | 17mL | 34 mL |
洗涤液A | 31.5mL | 63 mL |
洗涤液B | 13.5 mL | 27 mL |
洗脱液 | 10mL | 20 mL |
消化液 | 1.7 mL | 3.4 mL |
RNA Carrier | 0.35mL | 0.7 mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
产品介绍
BIOG Virus RNA Kit是常州百代生物科技股份有限公司研制的专门用于提取血清、血浆、胸腹水、脑脊液、滑膜液等病毒RNA的试剂盒。BIOG Virus RNA Kit采用了最新的优质进口离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,能高效地分离微量病毒RNA。提取得到的病毒RNA较其它品牌的同类试剂盒产量更大,纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。
操作步骤
请自行准备:无水乙醇、1.5mL离心管。
取出洗涤液,按以下操作:
a) 洗涤液A:31.5mL加入13.5mL无水乙醇;63mL加入27mL无水乙醇。
b) 洗涤液B:13.5mL加入31.5mL无水乙醇;27mL加入63mL无水乙醇。
c) 配制好的洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。
取15mL离心管,加入1500μL样本,30μLRNA Carrier混合均匀,加入1500μL 裂解液及150μL 消化液,振荡混匀,56℃水浴10 分钟。
加入6000μL无水乙醇,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响RNA的提取与后续实验。
将吸附柱放入收集管内,将4590μL上述溶液转入吸附柱内,静置2 分钟,5,000 rpm 离心2分钟,弃收集管内废液;
将吸附柱放回收集管内,将剩余4590μL溶液转移至吸附柱内,重复步骤5。
将吸附柱放回收集管内,加3750μL 洗涤液A至吸附柱内,5,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。
将吸附柱放回收集管内,加3750μL 洗涤液B至吸附柱内,5,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。
将吸附柱放回收集管内,5,000 rpm 离心2 分钟,离去残留的洗涤液。
取出吸附柱,放入新的15 mL 离心管内,加入250-400μL 洗脱液,静置3 分钟,5,000 rpm离心3 分钟,收集RNA溶液。提取的RNA即可用于下一步实验或-20℃保存。如需浓缩核酸,则可继续进行后续步骤。
于洗脱液中加入800ul无水乙醇,轻轻颠倒混匀,5,000 rpm 离心5分钟,弃上清。
开盖室温放置5min,待乙醇挥发后,加入30-50ul洗脱液溶解核酸。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。
建议样本量和加入试剂盒试剂组分比例:
样本量 | RNA Carrier | 消化液 | 裂解液 | 无水乙醇 | 洗涤液A | 洗涤液B |
1ml | 20ul | 100ul | 1000ul | 4000ul | 2500ul | 2500ul |
1.5ml | 30ul | 150ul | 1500ul | 6000ul | 3750ul | 3750ul |
注意事项:
裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。
储存、运输和有效期
本试剂盒可常温运输,室温(15-25℃)保存,有效期为12个月,消化液、RNA Carrier请于-20℃存放,避免反复冻融。