异构酶的测定实验_葡萄糖异构酶的测定实验
实验方法原理 | D-葡萄糖 ⇌ D-木果糖 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 实验所需「试剂」具体见「其他」 实验步骤与木糖异构酶基本相同,唯一不同的是在酶反应以及加完半胱氨酸后,咔唑和硫酸混合物可以放置 30 min 进行颜色反应,并且在 560 nm 处测吸光值,用 D-果糖准备校对曲线。 展开 |
注意事项 | |
其他 | 试剂: 0.2 mol/L TES/NaOH,pH 8.0[N-tris(羟甲基)-甲基-2-氨甲基酸,Mr=229.3;9.2 g 溶于 100 ml 水中,用 1 mol/L NaOH 调节至 pH 8.0,用水加至 200 ml] 2 mol/L D-葡萄糖(Mr=180.2;7.2 g 溶于 20 ml 水中) 0.03 mol/L CoCl2(含六分子水,Mr=237.9;71 mg 溶于 10 ml 水中) 1.5% 半胱氨酸·HCl(半胱氨酸·HCl-水合物,Mr=175.6;溶解 1.5 g 在 100 ml 水中) 0.12% 咔唑溶液(Mr=167.2;120 mg 溶于 100 ml 乙醇中) 70% 硫酸 展开 |
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