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如何测定抗体亲和力

2022.2.18

在《抗体工程》上有亲和力常数的测定方法,如平衡透析、竞争结合、荧光增强法、硫氰酸盐洗脱法、ELISA和固相放射免疫测定法(SPRIA)等。其中ELISA和SPRIA是最敏感的检测方法。通常采用竞争结合以及Scatchard作图法。如果有条件用SPR方法,这是目前国际上流行的方法,该方法灵敏,客观。

另外测亲和力之前最好先测定抗体的有效浓度,方法是夹心法,用标准免疫球蛋白做标准品。因为在作OD-抗体浓度曲线时如果抗体浓度不够,做不出来好的S形曲线,达不到最高值。所以建议你先测定抗体的浓度。如果浓度较低的话,你可以浓缩一下,方法很多,如PEG法,真空冷冻干燥,超速离心等等。

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