食品中合成着色剂的快速测定
1、方法原理
食品中的合成着色剂,在特定的缓冲溶液中,在滴汞电极上可产生敏感的极谱波,波高与着色剂的浓度成正比。当食品中存在一种或两种以上互不影响测定的着色剂时,可与标准系列进行比较定性、定量。现代化的微机极谱仪,操作比较简单,结果准确,分析速度快。
2、仪器
微机极谱仪。
3、试剂
(1)底液 A:磷酸盐缓冲液(可用于红色和黄色复合色素),可作菜红、胭脂红、日落黄、柠檬黄以及靛蓝着色剂的测定底液。称取13.6g 无水磷酸二氢钾(KH2PO4)和14.1g 无水磷酸氢二钠(Na2HPO4)[或35.6g 含结晶水的磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)]及10.0g 氯化钠,加水溶解后稀释至1L。
(2)底液 B:乙酸盐缓冲液(可用于绿色和蓝色复合色素),可作靛蓝、亮蓝、柠檬黄、日落黄着色剂的测定底液。量取40.0m 冰乙酸,加水约400mL,加入20.0g 无水乙酸钠,溶解后加水稀释至1L。
(3)1.00mg/mL 着色剂标准溶液和10.0μg/mL 着色剂标准使用溶液。
4、样品处理
(1)饮料和酒类 取样10.0～25.0mL 加热驱除 CO2 和乙醇,冷却后用200g/L NaOH 和 HCl(1+1)校至中性,然后加蒸馏水至原体积。
(2)表层色素类 取样5.0～10.0g,用蒸馏水反复漂洗直至色素完全被洗脱。合并洗脱液并定容至一定体积。
(3)水果糖和果冻类 取样5.0g,用水加热溶解,冷却后定容至25.0mL。
5、测定
(1)极谱条件 滴汞电极,一阶导数,三电极制,扫描速度250mV/s,底液 A 的初始扫描电位-0.2V,终止扫描电位-0.9V,参考峰电位为苋菜红-0.42V、日落黄-0.50V、柠檬黄-0.56V、胭脂红-0.69V、靛蓝-0.29V。底液B的初始扫描电位0.0V,终止扫描电位-1.0V,参考峰电位(溶液、底液偏酸使出峰电位正移,偏碱使出峰电位负移)为靛蓝-0.16V、日落黄-0.32V、柠檬黄-0.45V、亮蓝-0.80V。
(2)标准曲线制作 吸取着色剂标准使用溶液0,0.50mL,1.00mL,2.00mL,3.00mL,4.00mL 分别于10mL 比色管中,加入5.00mL 底液,用水定容至10.0mL(浓度分别为0,0.50μg/mL,1.00μg/mL,2.0μg/mL,3.00g/mL,4.00g/mL,0为试剂空白溶液)。混匀后于极谱仪上测定。
(3)样品测定 取样品处理液1.00mL,或一定量(复合色素峰电位较近时,尽量取稀溶液),加底液5.00mL,加水至10.00mL,摇匀后与标准系列溶液同时测定。记录样品峰高,用标准曲线法计算样品中着色剂的含量。
6、注释
(1)方法检出限与线性范围 合成着色剂的检出限一般可达到0.2μg/mL。标准曲线建立在0.20～5.00μg/mL 范围内,线性关系良好,r值一般可达到0.999。
(2)方法稳定性 将标准使用液和样品测定液室温放置30h(>30h未作),在汞瓶高度不变的情况下,其峰电位与峰高基本不变。底液室温放置6个月,磷酸盐底液中会出现少许絮状物,但对测定无影响。
(3)混合着色剂的极谱图 取磷酸盐底液或乙酸盐底液5mL,置10mL 比色管中,用微量注射器注入多种着色剂,用水稀释到10mL,使各着色剂的含量为0.50μg/mL,1.00μg/mL,2.00μg/mL,3.00ug/mL,在极谱仪上测定后由微机自动做出极谱图,见下面两图。磷酸盐底液适合于红色和黄色复合色素,可作苋菜红、胭脂红、日落黄、柠檬黄以及靛蓝着色剂的测定底液。乙酸盐底液适合于绿色和蓝色复合色素,可作靛蓝、亮蓝、柠檬黄、日落黄着色剂的测定底液。当测定一个未知着色剂的样品时,可采用图谱扫描的方式进行定性。
(4)着色剂间的影响 单一着色剂或两种以上的着色剂其出峰电位相隔较远时,定量很容易进行。当复合着色剂两个峰电位相隔较近时,将会对定量产生影响,减少取样量或较稀的溶液可使影响降低。
(5)极谱法测定食品中合成着色剂的选择性 极谱法测定食品中合成着色剂,方法简单,操作容易,结果出示快,尤其适合于样品中为单一色素及峰电位相隔较远的混合色素的测定。当测定峰电位相隔较近的混合色素时,需要摸索二者的影响程度,选择恰当的取样量或样品稀释程度。
