光合探针荧光测量技术MPF--准确获取Fm的新方法(二)
Multiphase FlashTM多相闪光技术分三阶段:(1)先打一个饱和闪光(Q),持续时间大约为300毫秒,用以还原QA-PQ库;(2)匀速降低Q值大约300毫秒;(3)回到最初的高Q值,保持约300毫秒,检查闪光引起的非光化学淬灭(QN)
根据第二阶段获得的Fm’值与1E4/ Q做回归分析来估算光强无限大时的最大荧光值。
Multiphase FlashTM多相闪光技术优于传统“饱和闪光”的其他证据:
使用Multiphase FlashTM多相闪光技术,即曲线拟合获取截距方法(intercept method)估算出最大的、真实的EFm’,由EFm’计算得到的电子传递速率J和总CO2同化速率之间的效率关系是真实的,满足理论要求的,而使用传统饱和闪光单一饱和闪光(single pulse method)得到的表观最大荧光产额AFm’,由AFm’计算得到的电子传递速率和总CO2同化速率之间的关系是背离理论的,明显小于4,如下图所示,左图为Loriaux S.D.于2013年发表于Plant Cell & Environment上的文章所述;右图为Earl H.于2004年发表于Photosynthesisi Research上的实验结论。
电子传递速率J和CO2总同化速率之间的量化关系
(理论最大效率:4个电子固定1个CO2)
使用Multiphase FlashTM多相闪光技术得到的EFm’计算出叶肉导度gm比传统“饱和闪光”方法得到的AFm’计算出的叶肉导度gm更真实合理,见下图: